Tuberkuloosin virtsa- ja syljenestit

Eri tuberkuloosin testejä ei selitetä tämän taudin helposti tunnistamisen, vaan sen oivalluksen avulla. Antiikin ajoista lähtien ihmiset ovat yrittäneet löytää tapaa tunnistaa testiä alkuvaiheessa, ja siksi he suorittivat erilaisia ​​tutkimuksia potilaista, joista osa todella tottui sairauden diagnoosimenetelmiin tai keinoihin tarkkailla taudin prosessia.

Mitkä ovat virtsan ja syljen testit?

Suoliston tuberkuloosin ja virtsan tuberkuloosin tankkitesti suoritetaan taudinaiheuttajan läsnäolon havaitsemiseksi kehon sisällä. Samaan aikaan näiden tutkimusten tarkoitus on todennäköisesti vahvistaa tauti nykyisten oireiden avulla eikä löytää sitä, koska alustavan ennaltaehkäisevän diagnoosin olemassa on monia muita luotettavampia menetelmiä.

Lisäksi, virtsa tai sylki ja syljen analyysi TB lääkärit voivat suorittaa tunnistaa siirtyminen suljetussa muodossa taudin osaksi auki, joka on tunnettu siitä, että vapauttaa suuria määriä basilleja luonnon nesteiden ja ulosteet potilaan, ja siksi tullut hyvin epidemiologisesti vaarallista muille.

Virtsa-testi

Vastaus kysymykseen siitä, miten virtsakokeen läpäiseminen tuberkuloosiin on melko yksinkertainen. Tuberkuloosin virtsaan kerätään kuten mikä tahansa tämän nesteen yleinen analyysi, joka on tuttu kaikille lapsuudelle:

  1. Aamulla on välttämätöntä kerätä ensimmäinen virtsaneritys keräämällä vain keskimmäinen osa, eikä se, joka menee ensin tai viimeiseksi.
  2. Ennen keräilyä on pestävä sekä säiliö että virtsaelimet huolellisesti, jotta mikään ei pääse purkkiin: proteiini, veri, bakteerit jne.
  3. Tarvittava määrä nestettä vain 50-100 ml: n tutkimusta varten, joten sinun ei pitäisi tuoda puoli litraa virtsa-ainetta.

OAM voidaan ottaa missä tahansa klinikassa, mutta tuberkuloosibakkiileja löytyy vain erityislaboratorioista, joita ei ole saatavilla kaikilla Venäjän paikkakunnilla. Tämän tutkimuksen tavanomaiset tulokset ovat seuraavat:

  1. Väri: keltainen, aurinkoinen keltainen tai olki.
  2. Läpinäkyvyys: korkea.
  3. Haju: unsharp.
  4. PH-reaktio: 4-7.
  5. Tiheys: 1012 - 1022 g / l.
  6. Proteiini: ei, mutta joskus jopa 0,033 g / l on hyväksyttävää.
  7. Glukoosi: jopa 0,8 mmol / l.
  8. Ketonielimet: ei.
  9. Bilirubin: ei.
  10. Urobilinogeeni: 5-10 mg / l.
  11. Hemoglobiini: ei.
  12. Erythrosyytit: naisilla suurin sallittu arvo on korkeintaan kolme ja miehillä jopa 1 on näkyvissä.
  13. Leukosyytit: elinten sallittavissa oleva lukumäärä on korkeintaan 6 naista ja enintään kolme miehillä.
  14. Epiteelisolut: jopa 10 kpl. näkyvissä.
  15. Sylinterit: ei lainkaan tai yksittäistä hyaliinia.
  16. Suola: ei.
  17. Bakteerit: ei.
  18. Sienet: ei.
  19. Loukkaukset: ei, mutta jos on, niin ei ole pelottavaa: juuri tässä tapauksessa hoidetaan anthelmintti-lääkkeitä.

Tuberkuloosin OAM-hinnat pysyvät samana. Ainoat poikkeukset ovat akuutit muodot taudin, kun virtsa on muuttunut, koska poikkeavuus sisäelimiin ja krooninen leesiot keuhkoissa tai luita, kun määritys voi olla oireita amyloidoosi - häiriöiden proteiinimetaboliaa jossa proteiini on läsnä kyselyn tulokset.

Poikkeuksena on munuaisten tai virtsateiden tuberkuloosi, joka on sairauden yleisin poikkeuksellinen muoto, joka aiheutuu tartunnan siirtämisestä verenkierrosta, jossa urinaalinen analyysi tuberkuloosiin vaihtelee suuresti. Tässä tapauksessa havaitaan seuraavia ilmiöitä:

  • jyrkästi hapanta pysyvää reaktiota;
  • leukosyturia - virtsaan leukosyytit;
  • proteinuria - proteiini virtsassa;
  • erytrosyturia - virtsaan verenvuoto;
  • pyuria - pus urissa.

Myös akuutti sairaus tai sen aikana tuberkuloosi munuaisten ja virtsateiden infektiot virtsassa on läsnä basilleja aktiivinen muoto ainetta, joka määritetään värjäämällä Ziehl-Nelson.

Salitesti

Itse asiassa BAC ei tuota tuberkuloosin syljen analysointia. Salsan analysointi on usein tuntematonta ihmistä, joka kutsuu tutkimaan ysköstä tuberkuloosin varalta. Kouristustestin sijaan tuberkuloosin syljen analysointi voidaan suorittaa vain hyvin pienillä vastasyntyneillä lapsilla, jotka eivät kykene sylkää ekspectoranttia, koska se automaattisesti nielee välittömästi välittömästi imeskelyn jälkeen. Kuitenkin tässä tapauksessa lääkärit ottavat vain kudoksen biopsia tai poistavat keuhkojen erittymisen koettimella, eivätkä he puhu sylkeä.

Taudinaiheuttajan yskösanalyysi suoritetaan myös käyttämällä Ziehl-Nelson-menetelmää. Tällöin lisäksi basilleja joitakin merkkejä keuhkojen patologian voi nähdä paljaalla silmällä: kuitumaisia ​​heittoja, mätä, veri, paloja kudosta, ja ns linssit - suuret sulkeumat pikkujuttu tai vähemmän pyöreä muoto, jonka sisällä on tavallisesti valtava määrä basilleja.

Ziehl-Nelsonin värjäysmenetelmä

Ziel-Nelson-värjäysmenetelmä perustuu Mycobacterium tuberculosis -happovastus, joka voidaan värjätä vain lämpökäsittelyllä. Tuolloin Tämän tutkimuksen, kehon kudokseen, yskös, virtsa, veri, tai mitä tahansa muuta ainetta, jonka analysointi läsnäolo viraston on tarpeen jättää suotuisan siementen leviämistä basilleja, jos ne ovat olemassa, tietenkin, ja kuumennettiin sitten ja värjättiin. Tämän jälkeen kaikki pidetään hapossa kunnes värimuutos on jälleen maalattu ilman lämmitystä toiselle värille. Tuloksena toimisto on melko helppo tunnistaa, koska ne ovat ensimmäisen väritysväri ja erottuvat hyvin yleiseen taustaan.

Phthisiology Notebook - Tuberkuloosi

Kaikki mitä haluat tietää tuberkuloosista

Veren ja virtsan testit tuberkuloosiin

VA Koshechkin, Z.A. Ivanova

Punaisen veren elementit muuttuvat pääsääntöisesti tuberkuloosin suhteen vähän. Vain kun akuutti verenmenetyksen keuhkoista tai suolistosta voi seurata anemiaa. Hemoglobiinin vähäinen lasku on nähtävissä kroonisten keuhkoputkien tuberkuloosin muodossa.

Yksi tuberkuloosiprosessin toiminnan indikaattoreista on ESR (erytrosyyttien sedimentaatioaste). Nopeutunut ESR korreloi paitsi nykyisen tuoreen prosessin aktiivisuuden ja laajuuden kanssa myös kroonisten, etenkin kuorikerroksisten prosessien pahenemiseen.

Veren leukosyyttiosuuden elementit reagoivat tuberkuloosiprosessiin aktiivisemmin.
Perinteisesti veren leukosyyttifraktiossa on kolme vaihetta muutoksissa, jotka liittyvät leukojen luonteeseen keuhkojen tuberkuloosissa.
1. Taistelun neutrofiilivaihe. Veressä neutrofiilien osuus kasvaa, minkä seurauksena kaava siirtyy vasemmalle. Eosinofiilit puuttuvat, lymfosyyttien ja monosyyttien määrä vähenee.
2. Monosyytti-vaihe - tartunnan voittaminen. Veressä lymfosyyttien määrä kasvaa, veren kaava siirtyy vasemmalle, neutrofiilien määrä vähenee, yksittäisiä eosinofiilejä havaitaan.
3. Vaiheen talteenotto. Lymfosyyttien ja eosinofiilien osuus kasvaa. Veren määrä vähenee asteittain.
Tämä erottaminen vaiheiksi heijastaa vain kokonaisveren reaktiota.

Ydinmagneettinen muutos tuberkuloosissa
Kvantitatiivisen lisäksi neutrofiiliryhmällä on kvalitatiivinen ominaisuus, joka on paljon ohuempi ja aikaisempi osoittaa erilaisia ​​patologisia prosesseja.

Aikuisten tuberkuloosi on yleensä toissijainen prosessi, useimmiten se aiheuttaa vain kasvavan neutrofiilien määrän veressä. Suurten infiltrattu-pneumoniaristen muotojen ja keuhkokudoksen hajoamisen ilmiöiden myötä neutrofiilien siirtyminen vasemmalle paljastuu melko selkeästi ja voi saavuttaa jopa 20-30% kaistaleydestä.

Keuhkoinfiltraatti ei hajoa, ja tuberkuloosin fokaliset muodot ensimmäisen havaitsemisen tai pahenemisvaiheen aikana subfebrile-lämpötilassa ja huonolaatuisilla toiminnallisilla häiriöillä antavat vähemmän selkeän siirtymän. Kuitenkin jäljellä olevat hemogrammielementit eivät välttämättä tunnista poikkeavuuksia lainkaan. Siksi ydinaseiden perusteellinen määritelmä on erityisen tärkeä tuberkuloosissa.

Neutrofiilien ydinvoiman siirtymistä koskevaa oppia kehitettiin Arnettilla (1905) perustuen verinäytteeseen erilaisissa infektioissa, mukaan lukien tuberkuloosi.

Monimutkaisten laskelmien tekeminen lukuisine piirroksineen Arneth huomasi jonkin verran säännöllisyyttä neutrofiilien ytimien konfiguraatiossa.

Terveellisen henkilön veri sisältää:

  • 5% neutrofiilejä laimentamattomilla bannereilla, segmentoitumaton ydin (I-luokka);
  • 35% neutrofiilejä, joissa on kaksi segmenttiä, jotka on liitetty kierteisellä kavennuksella (luokka II);
  • 41% neutrofiileistä, joissa on kolme segmenttiä (luokka III);
  • 17% neutrofiilejä, joissa on neljä segmenttiä (luokka IV);
  • 2% neutrofiilejä, joissa on viisi segmenttiä (V-luokka).

Artonin segmentoitumisen lisäksi Arnet otti huomioon sen muodon. Täten ensimmäisen luokan osalta hän erotti useita alaluokkia ei-segmentoidun ytimen sisennysasteen mukaan. Jäljellä olevat luokat jaetaan alaluokkiin segmenttien muodon mukaan.

Infektioissa suhteessa niiden vakavuuteen monissegmentoitujen lomakkeiden määrä vähenee, vähäsegmentoitujen (2-3 segmenttien) ja segmentoitujen (suhteellisen nuorten solujen) määrä kasvaa.

Arneth-järjestelmässä näkyy vasemmalla olevan epäsegmentoitujen luokan I neutrofiilien lukumäärä; oikealla on luokan II solujen määrä, sitten luokka III ja niin edelleen. Näin ollen segmenttien ja segmenttien vähenemisen lisääntyessä solujen lukumäärä piirin vasemmalla puolella lisääntyy ja on vasemmanpuoleinen siirtymä.

Virtsan analysointi
Virtsaneritys tuberkuloosipotilailla on melkein normaalia. Virtsan patologiset muutokset voivat olla munuaisten tai virtsateiden tuberkuloosin tukahduttamisessa.
Potilailla, joilla on krooninen keuhkotuberkuloosi, voidaan havaita amyloidoosin oireita.

3.7 Veren ja virtsan analyysi.

Punaisen veren elementit muuttuvat pääsääntöisesti tuberkuloosin suhteen vähän. Vain kun akuutti verenmenetyksen keuhkoista tai suolistosta voi seurata anemiaa. Hemoglobiinin vähäinen lasku on nähtävissä kroonisten keuhkoputkien tuberkuloosin muodossa. Yksi tuberkuloosiaktiivisuuden indikaattoreista on ESR (erytrosyyttien sedimentaatioaste). Nopeutunut ESR korreloi paitsi nykyisen tuoreen prosessin aktiivisuuden ja laajuuden kanssa myös kroonisten, etenkin kuidunvaihtoprosessien pahenemisen kanssa. Veren leukosyyttiosuuden elementit reagoivat tuberkuloosiprosessiin aktiivisemmin.

Perinteisesti veren leukosyyttifraktiossa on kolme vaihetta, jotka liittyvät lauttojen luonteeseen keuhkojen tuberkuloosissa:

  1. Neutrofiilinen - taistelun vaihe. Veressä neutrofiilien osuus kasvaa, minkä seurauksena veren kaava siirtyy vasemmalle. Eosinofiilit puuttuvat, lymfosyyttien ja monosyyttien määrä vähenee. Lymfopenia on tyypillistä tuberkuloosin progressiivisille muodoille.
  2. Monosyyttivaihe - tartunnan voittaminen. Veressä lymfosyyttien määrä kasvaa, veren kaava siirtyy vasemmalle, neutrofiilien määrä vähenee, yksittäisiä eosinofiilejä havaitaan.
  3. Palautusvaihe Lymfosyyttien ja eosinofiilien osuus kasvaa. Veren määrä vähenee asteittain.

Tällainen jakautuminen faaseihin heijastaa vain yleisiä verireaktioita, jotka eivät heijasta kroonisen tuberkuloosin infektioiden veren reaktioiden monimutkaisuutta.

Ydinmagneettinen muutos tuberkuloosissa.
Kvantitatiivisen lisäksi neutrofiiliryhmällä on kvalitatiivinen ominaisuus, joka on paljon ohuempi ja aikaisempi osoittaa erilaisia ​​patologisia prosesseja. Aikuisten tuberkuloosi, yleensä jälkikäteen tapahtuva prosessi, aiheuttaa useimmiten ainoastaan ​​veren neutropenkien lisääntymisen. Suurten infiltratio-pneumoniaristen muotojen ja keuhkokudoksen hajoamisen ilmiöiden myötä neutrofiilien siirtyminen vasemmalle paljastuu melko selkeästi ja voi saavuttaa jopa 20-30% puutumasta.

Keuhkoinfiltraatti ilman hajoamista ja tuberkuloosin fokusoivat muodot ensimmäisellä havaitsemisajanjaksolla tai pahenemisvaiheessa alilämpötilassa ja huonolaatuisissa toiminnallisissa häiriöissä heikentynyt muutos. Samaan aikaan hemogrammin jäljellä olevat osat voivat olla täysin vailla poikkeavuuksia. Siksi ydinaseiden perusteellinen määrittely saa diagnostista arvoa tuberkuloosissa.
Neutrofiilisen ydinvoiman siirtymän tutkimusta edelsi Arneth (Arneth), joka perustui verin tutkimukseen eri infektioissa ja erityisesti tuberkuloosissa. Monimutkaisten laskelmien tekeminen lukuisine piirroksineen Arneth huomasi jonkin verran säännöllisyyttä neutrofiilien ytimien konfiguraatiossa. Terveellisen henkilön veressä neutrofiilit laimentamattomilla bannereilla, ei-segmentoitunut ydin (luokka I) ovat 5%; neutrofiilejä, joissa on kaksi segmenttiä, jotka on liitetty filiformaalisella supistuksella (luokka II) - 35%, luokka III - 41%, luokka IV - 17% ja luokka V - 2%. Infektioissa suhteessa niiden vakavuuteen monien segmentoidun muodon määrä vähenee, vähiten segmentoitujen (2-3 segmenttien) määrä ja segmenttimättömät kasvavat. Arneth-järjestelmässä vasemmalle on kirjoitettu ei-segmentoitujen neutrofiilien määrä; oikealle on luokan II, sitten III luokka jne. solujen lukumäärä jne. Näin ollen, kun segmentti- ja segmentoitumattomia muotoja lisätään, solujen lukumäärä piirin vasemmalla puolella lisääntyy ja tapahtuu vasemmanpuoleinen siirtymä.

Tuberkuloottisen prosessin merkit hemogrammin muutosten lisäksi ovat hyponatriamaa. Se on tyypillisin metabolinen muutos. Hyponatremian syy on keuhkojen tuberkuloosin vaikutuksen alainen antidiureettinen hormoni. Erityisen intensiivisesti tätä ainetta tuotetaan tavanomaisissa väärennöksissä.

Virtsan analysointi
Virtsaneritys tuberkuloosipotilailla on melkein normaalia. Virtsan patologiset muutokset voivat olla munuaisten tai virtsateiden tuberkuloosin tukahduttamisessa. Proteiineja, leukosyyttejä, MBT havaitaan virtsassa. Potilailla, joilla on krooninen keuhkojen tai luiden tuberkuloosi, voidaan havaita amyloidoosin oireita (resistentti pururiitti, brutto hematuria).

Tuberkuloosin diagnosointi veren ja virtsan analysoinnissa

Punaisen veren elementit muuttuvat pääsääntöisesti tuberkuloosin suhteen vähän. Vain kun akuutti verenmenetyksen keuhkoista tai suolistosta voi seurata anemiaa. Hemoglobiinin vähäinen väheneminen näkyy kroonisissa fibroa-kouru-tuberkuloosissa.

Yksi tuberkuloosiprosessin toiminnan indikaattoreista on ESR (erytrosyyttien sedimentaatioaste). Nopeutunut ESR korreloi paitsi nykyisen tuoreen prosessin aktiivisuuden ja laajuuden kanssa myös kroonisten, etenkin kuukautisten prosessien pahenemisen kanssa.

Veren leukosyyttiosuuden elementit reagoivat tuberkuloosiprosessiin aktiivisemmin.

Perinteisesti veren leukosyyttifraktiossa on kolme vaihetta muutoksissa, jotka liittyvät leukojen luonteeseen keuhkojen tuberkuloosissa.

  1. Taistelun neutrofiilinen vaihe. Veressä neutrofiilien osuus kasvaa, minkä seurauksena kaava siirtyy vasemmalle. Eosinofiilit puuttuvat, lymfosyyttien ja monosyyttien määrä vähenee.
  2. Monosyyttivaihe - tartunnan voittaminen. Veressä lymfosyyttien määrä kasvaa, veren kaava siirtyy vasemmalle, neutrofiilien määrä vähenee, yksittäisiä eosinofiilejä havaitaan.
  3. Palautusvaihe Lymfosyyttien ja eosinofiilien osuus kasvaa. Veren määrä vähenee asteittain.

Tämä erottaminen vaiheiksi heijastaa vain kokonaisveren reaktiota.

Ydinmagneettinen muutos tuberkuloosissa

Kvantitatiivisen lisäksi neutrofiiliryhmällä on kvalitatiivinen ominaisuus, joka on paljon ohuempi ja aikaisempi osoittaa erilaisia ​​patologisia prosesseja.

Aikuisten tuberkuloosi on yleensä toissijainen prosessi, useimmiten se aiheuttaa vain kasvavan neutrofiilien määrän veressä. Suurten infiltrattu-pneumoniaristen muotojen ja keuhkokudoksen hajoamisen ilmiöiden myötä neutrofiilien siirtyminen vasemmalle paljastuu melko selkeästi ja voi saavuttaa jopa 20-30% kaistaleydestä.

Keuhkoinfiltraatti ei hajoa, ja tuberkuloosin fokaliset muodot ensimmäisen havaitsemisen tai pahenemisvaiheen aikana subfebrile-lämpötilassa ja huonolaatuisilla toiminnallisilla häiriöillä antavat vähemmän selkeän siirtymän. Kuitenkin jäljellä olevat hemogrammielementit eivät välttämättä tunnista poikkeavuuksia lainkaan. Siksi ydinaseiden perusteellinen määritelmä on erityisen tärkeä tuberkuloosissa.

Neutrofiilien ydinvoiman siirtymistä koskevaa oppia kehitettiin Arnettilla (1905) perustuen verinäytteeseen erilaisissa infektioissa, mukaan lukien tuberkuloosi.

Monimutkaisten laskelmien tekeminen lukuisine piirroksineen Arneth huomasi jonkin verran säännöllisyyttä neutrofiilien ytimien konfiguraatiossa. Terveellisen henkilön veri sisältää:

  • 5% neutrofiilejä laimentamattomien kiekkojen, ei-segmentoidun ytimen (luokka I) kanssa;
  • 35% neutrofiilejä, joissa on kaksi segmenttiä, jotka on liitetty kierteisellä kavennuksella (luokka II);
  • 41% neutrofiileistä, joissa on kolme segmenttiä (luokka III);
  • 17% neutrofiilejä, joissa on neljä segmenttiä (luokka IV);
  • 2% neutrofiilejä, joissa on viisi segmenttiä (V-luokka).

Artonin segmentoitumisen lisäksi Arnet otti huomioon sen muodon. Niinpä luokalle hän erotti useita alaluokkia ei-segmentoituneen ytimen masennuksen mukaan. Jäljellä olevat luokat jaetaan alaluokkiin segmenttien muodon mukaan.

Infektioissa, suhteessa niiden vakavuuteen, monisegmenttisten muotojen määrä vähenee, vähäsegmentoitujen (2-3 segmenttien) ja segmentoitujen (suhteellisen nuorten solujen) määrä kasvaa. Arneth-järjestelmässä näkyy vasemmalla olevan epäsegmentoitujen luokan I neutrofiilien lukumäärä; oikealla on luokan II solujen määrä, sitten luokka III ja niin edelleen. Näin ollen segmenttien ja segmenttien vähenemisen lisääntyessä solujen lukumäärä piirin vasemmalla puolella lisääntyy ja on vasemmanpuoleinen siirtymä.

Virtsan analysointi

Virtsaneritys tuberkuloosipotilailla on melkein normaalia. Virtsan patologiset muutokset voivat olla munuaisten tai virtsateiden tuberkuloosin tukahduttamisessa.

Potilailla, joilla on krooninen keuhkotuberkuloosi, voidaan havaita amyloidoosin oireita.

35. Veren ja virtsan testien diagnostinen arvo potilailla, joilla on tuberkuloosi.

Veritesti Hemoglobiini ja punasolut eivät useimmissa tapauksissa pysy ennallaan, lukuun ottamatta tapauksia, joissa on akuutti verenhukka. Aktiivisen tuberkuloosiprosessin läsnäolon osoittava indikaattori on erytrosyyttien sedimentaatioaste. Nopeutettu ESR on ominaista paitsi tuoreen aktiivisen tuberkuloosin lisäksi myös kroonisen prosessin pahenemiseksi. Loput verikokeiden indikaattorit vaihtelevat suuresti riippuen keuhkovaurion luonteesta. Peruutin-indikaattoreiden muutokset. veressä, kun tuberk. puuttuu spesifisyys, mutta hemogrammi auttaa diagnosoimaan. tuberk-faasi. käsitellä ja arvioida taakkaa. hänen virtauksensa. Tuberkuloosia ja tuberkuloosia sairastavat henkilöt. yhteiseen kiilaan. veritesti ESR: n määritelmän mukaan, sisältö eritr. ja leukot, hemoglobiinipitoisuus ja leukosyyttien kaavan laskeminen. Tuberkuloosilääkkeitä suositellaan pyemian läsnäollessa. määritetään retikulosyyttien määrä regeneroinnin arvioimiseksi. luuytimen kyvyt, erilaistuneissa diagnostisissa tapauksissa - verihiutaleiden määrä. Hematologin muutokset. indikaattorit riippuvat toisaalta infin paikallisuudesta, luonteesta ja vakavuudesta. prosessi, toisaalta - kehon tilasta, sen korvaavista varauksista. Hemogrammi har. pikemminkin prosessin vaihe kuin sen kiila. muoto. Esimerkiksi potilailla, joilla on yhteisiä tuhoisat tuberkuloosilajit, joilla on korvaava prosessi ja tuoreen tulehduksen puuttuminen. Veren kuvan muutokset voivat olla normaaleja. Teroitusputket. prosessiin liittyy yleensä neutrofiilien puukonsiirto, lymfopenia ja ESR: n kasvu. Tot. leukosyyttien sisältö na. useimmat potilaat normaalilla alueella. Vain akuutilla ja vaikeilla kurssilla on luonteenomaista, että veren leukosyyttien pitoisuus kasvaa 15 x 109 / l: ksi. Leukosyyttisen kaavan neutrofiilinen muutos vasemmalle samanaikaisesti muuttuu merkittävämmäksi. Vakavissa tautitapauksissa (erityisesti miliary tuberkuloosissa) voi esiintyä myeloidityypin leukemoidireaktio. Akuuttisen prosessin helpotus aiheuttaa näiden muutosten normalisoinnin, lymfosytoosin esiintymisen. Neutropeniaa ja lymfosytoosia voidaan havaita kroonisessa hematogeenisessa levinneessä ja polttomaalisessa tuberkuloosissa.

Virtsan analysointi Virtsan analysoinnissa potilailla, joilla on keuhko tuberkuloosi, ei ole huomattavia poikkeamia normaalista. Muutokset näkyvät vain munuaisten ja virtsateiden tuberkuloosissa. Tuberkuloosin rutiinipuhdistus ei ole välttämätön vain, jos munuaisvaurioita epäillään. Viimeisenä jos hän on yksi. varhaisen diagnoosin varalta. Virtsan jatkuva läsnäolo virtsaan ja, mikä tärkeintä, tuba. bakteerit, tietenkin, viittaa kylpyammeeseen. munuaiset. Kuitenkin, joskus se on toistettava. Issled. virtsaan patologin havaitsemiseksi. havainnoista; niin joillakin. tuberkuloosin muodot kuukausittainen virtsatesti (levitetty muoto, monimutkainen ensisijainen, monimutkainen). Pienet muutokset virtsassa proteiinien jäljessä, yksi. leukosyyttejä ja tuoreita erytrosyyttejä voidaan säännöllisesti havaita yleisen myrkytyksen ilmiöinä. Lopuksi jotkut virtsan reaktiot antavat merkkejä prosessin vakavuudesta. Niistä on diazo-reaktion ulkonäkö yleistyksen aikana. tuberkuloosin muodot, erityisesti miliary tuberkuloosin varalta.

Epäilemättä prognostinen arvo tuberkuloosin aikana on urokromogeeninen ratkaisu. Se on hyvin yksinkertainen, ja tämä on sen suuri etu. Hän on valmistettu. merkki. : Ota suodatettu virtsa ja laita se 10 kertaa. Kaada kahteen putkeen, toinen toimii kontrollina ja lisätään liuos, jossa kaliumpermanganaattia 1: 1000. Positiivinen reaktio putkessa aiheuttaa terävän kanarianvärjäyksen, mikä nähdään hyvin selvästi verrokkiin verrattuna. On otettava huomioon vain hyvin ilmaistu. väri. Reaktion mekanismi on, että kaliumpermanganaatti hapettaa värittömän urokromogeenin virtsassa, mikä on merkittävästi kohonnut progressiivisen tuberkuloosin tapauksessa.

Mitkä ovat keuhkotuberkuloosin testit?

Laboratoriotestit kulkevat kaikki potilaat. Koska patologia on tarttuvaa toisille, biologisen aineiston ajoissa tapahtuva tutkimus edistää diagnoosin tarkkuutta ja auttaa hallitsemaan hoidon kulkua.

Luettelo laboratoriotesteistä keuhkojen tuberkuloosista

Luettelo tuberkuloosista

Keuhkotuberkuloosin pakollisten testien luettelo on seuraava:

  • ysköstutkimus - siinä esiintyy onteloita, riisirenkeitä, proteiineja, elastisia kuituja ja kalsiumsuoloja;
  • eksuudan analyysi - osoittaa neutrofiilejä ja endoteelisoluja, joilla vallitsevat leukosyytit;
  • bronchoalveolar-huuhtelun analyysi osoittaa, että alveolaaristen makrofagien määrä on pienentynyt neutrofiilien voimakasta lisääntymistä tuberkuloosiprosessin aktiivisella kurssilla ja että makrofagien indikaattorien inaktiivinen kulku kasvoi hieman;
  • serologiset määritykset tai entsyymi-immunomääritykset, testataan seerumin immunoglobuliinien määrittämiseksi mykobakteeri-antigeeneille. Diagnostisen vasta-ainetitterin suhde taudin aiheuttavaan aineeseen ylittää arvon 1: 8.

Mitä verikokeiden tulokset osoittavat?

Keuhkotuberkuloosin veren biokemiallisen analyysin ansiosta asiantuntijoilla on kyky määrittää veren seerumin proteiinin ja sen jakeiden suunnan muutokset. Tämä määrittää taudin muodon ja vaiheen. Urinihappo-, kupari-, kolesteroli- ja lysotsyymitasot ylittyvät. Kreatiinikinaasia ja angiotensiinikonvertausentsyymiaktiivisuutta havaitaan. Hengitysaktiivinen happamuus kehittyy johtuen pH: n laskusta ja pCO2: n kasvusta.

Hemoglobiinin suhteen niiden vähentäminen, joka johtaa anemian kehittymiseen, ei ole tyypillistä tuberkuloosiprosessille.

Virtsaneritys tuberkuloosipotilailla

Teekö virtsakokeet keuhkojen tuberkuloosiin?

Virtsaneritys tuberkuloosista potilailla on edelleen normaali. Patologiset muutokset tapahtuvat tavallisesti, jos munuaiset ja virtsateet ovat mukana tuberkuloosiprosessissa. Potilailla, joilla on taudin krooninen muoto, amyloidoosin oireita voidaan havaita tutkimuksen aikana.

Mikä on keuhkojen tuberkuloosin virtsan analyysi, mitkä tiedot voivat viitata patologisen prosessin kehittymiseen?

  1. Tiheys on 1 015 - 1 025.
  2. Erytrosyyttien läsnäolo on sallittua lapsille - enintään 5.
  3. Valkosolujen pitäisi olla korkeintaan 2 yksikköä, naisille ja tytöille - enintään 5 yksikköä.
  4. Suolan arvot eivät saisi olla merkittäviä.
  5. Litteän epiteelin sallittu arvo on enintään 5 yksikköä.

Mitä tulee verikokeeseen keuhkojen tuberkuloosista

Tuberkuloosi on vaarallinen ja vaikea sairaus. Hoidon tehokkuus riippuu siitä, kuinka nopeasti se havaittiin. Kukaan ei ole vakuutettu infektioita vastaan, ehdottomasti jokainen voi saada sairaita - aikuiset, lapset, vanhukset.

Tarvittavan oikea-aikaisen hoidon puuttuessa suljettu muoto muuttuu vaaralliseksi avoimeksi, joten taudin alkuvaiheessa diagnoosi on äärimmäisen tärkeää, ja se voidaan saavuttaa säännöllisin ja kattavalla tutkimuksella.

Tässä artikkelissa tarkastellaan erilaisia ​​menetelmiä tämän keuhkosairauden diagnosoimiseksi ja yritetään myös selvittää, mikä verenmittaus keuhkoveren tuberkuloosiin on luotettava ja informatiivinen.

Kun on tarpeen tarkistaa tuberkuloosi

Joten tutkiminen on välttämätöntä:

  • yhteydenpito tautien kantajiin;
  • yleinen heikkous;
  • laihtuminen;
  • lämpötilan nousu illalla;
  • krooninen yskä.

On erityisen tärkeää määrittää ajan mittaan tuberkuloosin esiintyminen lapsuuteen, koska lapsilla on erittäin todennäköistä, että infektio aiheuttaa uusia patologisia prosesseja kehossa.

Se on tärkeää! Yksi ehkäisevistä toimenpiteistä on BCG-rokotus lapsen elämässä 4. päivänä ja 7-vuotiaana. Lapsen keho on heikompi kuin aikuinen, joten on tärkeää suojata infektiolta ja laskea rokotukset.

Epäillyn tuberkuloosin tutkimus

Tuberkuloosi voidaan havaita useilla eri tavoilla.


Kuva 1. Tuberkuloosin potilaan rinnan röntgenkuva. Fluorografia on yksi luotettavimmista menetelmistä tämän taudin diagnosoimiseksi, mutta on tehokkainta yhdessä muiden kanssa. Esimerkiksi yksityiskohtainen verikoke näyttää tuberkuloosin jo varhaisessa vaiheessa.

  1. Röntgenkuvaus. Fluorografia auttaa arvioimaan keuhkovaurion astetta. On kuitenkin pidettävä mielessä, että röntgenkuva ei osoita taudin alkuvaiheita. Tutkimuksen olisi oltava kattava. Tarkempaan tutkimukseen potilaan keuhkot on kuvattava sekä edestä että takaa.
  2. Tuberkuliinitesti. Lapsia tutkittaessa käytetään useimmiten tuberkuliinitestiä (Mantoux-testiä). Tuberkuliini on seos kuolleista patogeeneistä eristetyistä proteiineista. Lääkkeen käyttöönotto ihon alle aiheuttaa immuniteetin, joka ilmenee eri tavoin. Jos elimistössä ei ole taudinaiheuttajia, muutaman päivän kuluttua pistoksesta jää tuskin havaittavissa oleva merkki. Injektiokohdan tulehduksen tai absessin muodostumisen seurauksena potilaan infektio todennäköisyys on korkea.

Se on tärkeää! Mantoux-testi ei salli 100-prosenttisen todennäköisen tuberkuloosin esiintymistä, mutta se auttaa määrittämään taudin riskiryhmän. Hoitokokeita tulisi tehdä allergialääkkeille. Keho voi reagoida koostumuksen käyttöönottoon ennalta arvaamattomalla tavalla.

  1. Veritesti Tulokset auttavat havaitsemaan patogeenin jälkiä. Nimetty tunnistamaan taudin lopullinen diagnoosi ja laajuus.
  2. Suun koostumus. Mycobacterium tuberculosis läsnäolo mahdollistaa kynnen tunnistamisen ja tutkimisen. Materiaalia havaitaan ylittävän proteiinin indikaattoreiden standardin, joka erottaa sen keuhkoputkesta ja tarttuvista tekijöistä.

Onko mahdollista määrittää tuberkuloosi yleisellä verikokeella?

Punasolujen (punasolut) koostumus bakteerien läsnä ollessa vaihtelee hieman. Akuutti suoliston tai keuhkoverenvuodot aiheuttavat anemiaa, mikä hemoglobiinin merkittävä heikkeneminen.

On olemassa ihmisiä, jotka epäilevät, onko tuberkuloosista mahdollista päättää verikokeella. Itse asiassa yleinen analyysi pystyy tunnistamaan elimistössä kehittyvät tulehdus- ja patologiset prosessit ESR: n lisääntyneen indikaattorin mukaan. Korotettu nopeus ilmaisee paitsi nykyisen tulehduksen aktiivisuutta ja kestoa myös kroonisen pahenemisen, erityisesti taudin lopullisissa vaiheissa.


Kuva 2. Lääkäri suorittaa menetelmän veren keräämiseksi potilaan laskimoon ruiskulla. Tämän jälkeen suoritetaan verikoke, tuberkuloosi, jonka indikaattorit osoittavat tulehdusprosesseja.

Se on tärkeää! ESR-tasoja voidaan sekoittaa tulehduksen tai keuhkosyövän indikaattoreihin. Tässä tapauksessa on tarpeen tutkia eosinofiilien määrää (yksi valkosolujen tyypeistä). Jos eosinofiilejä suurennetaan ja leukosyytti-kaava osoittaa dramaattisia muutoksia verikokeessa, tämä tapahtuu tuberkuloosilla ja se suljetaan pois keuhkokuumeella.

Ovatko kliiniset ja biokemialliset verikokeet tarkkoja?

Keuhkotuberkuloosin veritesti on usein riittämätön tuberkuliiniannoksen diagnosoimiseksi. Tällöin tarvitaan täydentäviä tutkimuksia. Samaa voidaan sanoa veren biokemiallisesta analyysistä. Tuberkuloosin tai piilevän muodon alkuvaiheessa se ei todennäköisesti näytä mitään poikkeavuuksia. Ainoastaan ​​akuutin sairauden muodoissa alumiini-globuliinin kerroin vähenee.

Tyypilliset verikokeet tuberkuloosi-vasta-aineille

On tarkempi, syvällisempää kuin OAK, verikokeiden menetelmät, joiden avulla voidaan havaita tuberkuloosi. Kuinka määritellä tällaisista verikokeista, jos sinulla on tauti, harkitse seuraavaksi.

Tavoitteena olevan diagnoosin määrittäminen on mahdollista käyttämällä polymeraasiketjureaktion (PCR) ja entsyymi-immunosorbenttimäärityksen (ELISA) lähestymistapoja.

Käyttääkö ELISA-menetelmä tuberkuloosin esiintymistä?

ELISA: n avulla havaitaan patogeenisten vasta-aineiden esiintyminen potilaassa. Menetelmä on kätevä, koska sen avulla voit tutkia samanaikaisesti suurta määrää näytteitä. Sen herkkyys on kuitenkin alhainen, ja se on suositeltavaa käyttää alueilla, joilla on alhainen esiintyvyys.

Mitä muutoksia PCR-menetelmä paljastaa?

PCR-menetelmä on tehokkaimpia. Sitä käytetään sairauden tunnistamiseen, vakavuuden ja remission määrittämiseen hoidon aikana etsimällä mikrobakteerien DNA.

PCR: tä käytetään:

  • Kochin progressiivisen sauvan havaitseminen;
  • testi ylimääräisen tuberkuloosin toteamiseksi;
  • siipikarjan nopean sijoittamisen tartunnan lokalisoimiseksi;
  • taudin toistumisen diagnosointi;
  • seurataan hoitojaksoa.

Sekä hän että muut verikokeet tuberkuloosin vasta-aineille katsotaan varsin luotettaviksi. Mutta on muita.

Vaihtoehtoiset verikokeiden menetelmät

Interferoni Gamma Release -määritykset ovat harvinaisempia kuin PCR ja ELISA patogeenisten mikrobakteerien havaitsemiseksi. Se voidaan tehdä tuberkuliinitestin sijasta. Reaktio ilmaisee gamma-interferonin muodostumista mikrobaktoreiden käyttöönoton johdosta. Tulokset voivat määrittää tarkasti tartunnan läsnäolon.

Toinen vaihtoehtoinen tutkimusmenetelmä on QuantiFERON-TB Gold. Tätä menetelmää käytetään useimmiten sellaisten lasten testaamiseen, joilla on voimakas allerginen reaktio tuberkuliinitutkimukseen.

Se on tärkeää! Molemmat menetelmät eivät salli infektion asteen - aktiivisen tai piilevän.

Lääkäri määrää, minkä tyyppistä verikokea käytetään. Useimmiten tutkimuksessa tehdään monimutkainen. Piilevän tuberkuloosin verikoke ei ehkä anna lainkaan tuloksia.

Miten verikokeiden indikaattorit ovat

Yleisen verikokeen tulkinnassa on kiinnitettävä huomiota ESR: n, hemoglobiinin ja leukosyyttien tasoon.

ESR: n taso terveessä henkilössä on alle 50 yksikköä, ylimäärin tämä indikaattori osoittaa kehon tulehdusprosessia.

Tuberkuloosin potilaan veren leukosyyttien määrä on 6 - 10 9 / l akuuteissa ja vakavissa tautitapauksissa - 12-15 - 10 9 / l.

Punasolujen koostumus useimmilla potilailla pysyy normaalina. Alhainen hemoglobiini on kirjattu miliary tuberkuloosiin, keuhkoahtaumatauti.

Taudin akuutit, progressiiviset ja monimutkaiset muodot muuttavat leukogrammia. Joissain tapauksissa havaitaan kohtalainen leukosytoosi (jopa 10 000 - 15 000 leukosyyttiä), vähemmän yleisesti leukopenia.

Mitä tahansa keuhkotuberkuloosista tehty verikokemus, niiden salakuuntelu on kokeneen ammattilaisen työtä. Vain he voivat tarkasti määritellä, miten tuberkuloosi on käynnissä, jos sitä vielä havaitaan. ELISA- ja PCR-analyysejä dekoodataan samalla tavalla. Erityismuodoissa negatiivinen tai positiivinen tulos on osoitettu vastaavan infektion vastaisesti.

Hoitotestien tyypit

Hoidon vaikeus on se, että infektio voi kestää kaikenlaisia ​​antibiootteja, etenkin edenneissä vaiheissa, sekä pitkä inkubointijakso, jonka aikana infektiota ei ole mahdollista määrittää.

Tunnistamalla ja määrittämällä asianmukainen hoito, paranemisprosessia seurataan 1-2 kertaa kuukaudessa. Potilas antaa veren ja vatsan.


Kuva 3. Lääkärin lääketieteellinen taulukko potilaan ysköksen keräämisen jälkeen. Yskösnäytteet on suljettu muoviputkiin ja odottaneet laboratoriotestausta.

Voit ottaa täydellisen verenlaskun, Mantoux-kokeen, ja voit läpikäydä fluorografian melkein missä tahansa lääketieteellisessä keskuksessa. Tämä tapahtuu välittömästi, jos epäillään. Saatujen tietojen perusteella terapeutti tekee johtopäätöksen patologisten muutosten puuttumisesta elimistössä tai antaa viittauksen lisätutkimukseen putkipakkauksessa.

TB: n apteekeissa on erikoistuneita ja tarkempia tutkimuksia, joissa on laboratorioita ja tarvittavat tutkimusreagenssit.

Joten, yhteenveto edellä:

  • tuberkuloosi on vaarallinen tauti, joka on äärimmäisen tärkeää havaita ajoissa;
  • lisääntynyt ESR, tummuminen keuhkoissa, muutokset leukogrammissa muodostavat perustan lähettää potilas jatkotutkimukseen infektion havaitsemiseksi;
  • hoito suoritetaan TB-lääkkeiden avulla; Hoidon intensiivinen vaihe jatkuu, kunnes saavutetaan positiiviset kliiniset ja radiologiset indikaattorit.

Hyödyllinen video

Tarjoamme katsomaan videota, joka vastaa myös kysymykseen, onko tuberkuloosin havaitseminen verikokeella mahdollista. Siinä kuvataan tarkemmin QuantiFERON TB Gold -quantiferonikokeesta, joka osoittaa verin tuberkuloosin analyysissä immuunivasteella.

Täydellisen veren laskemisen tuberkuloosiin aikuisilla ja lapsilla

Infektio tuberkuliinisella bacilluksella ei enää ole lauseelle henkilölle. Nykyaikainen lääketiede käyttää tehokkaita välineitä taudin torjumiseksi, jos se havaitaan varhaisessa vaiheessa. Säännölliset ennaltaehkäisevät tutkimukset ja testit, mukaan lukien yleinen verikoke tuberkuloosiin, auttavat havaitsemaan patologian ajoissa.

Muutokset kliinisessä kuvassa

Täydellinen veren määrä pulmonaarista tuberkuloosia varten (UAC) ei ole erityisiä ilmentymiä. Tuberkuloosin kehityksestä ei puhuta markkereita eikä tautitapahtumaa. Epäspesifisillä merkkeillä voidaan kuitenkin arvioida latentti tulehdusprosessi ja epäilyttävät muutokset keuhkoissa.

Punasolujen poikkeaminen normaalista

Hidas muoto tai lokalisoitu vaurio, erytrosyyttien määrä veressä ei muutu, mutta niiden väri muuttuu. Hemoglobiinitaso erytrosyytissä vähenee. Tätä sairautta kutsutaan hypokromiaksi.

Keuhkokudoksen merkittävillä infiltratoivilla leesioilla kliininen verikokeessa on havaittu punasolujen lukumäärän vähenemistä, pienempi koko. Syntyvät solut - retikulosyytit, jotka ovat punasolujen "esiasteita". Tuberkuloosin alkuvaiheessa retikulosyyttien määrä ei ole yli 0,5%.

Vaikea anemia on yleisempi aikuisilla, joilla on kehittynyt tuberkuloosi. Samalla retikulosyyttien määrä kasvaa 1 prosenttiin punasolujen kokonaismäärästä.

Leukosyyttien vaihto

Leukosyyttejä immuunijärjestelmän soluina käytetään vastauksena tautiin ensiksi. Yleisen veritestin ja leukogometrisen tutkimuksen mukaan sekä tulehdusprosessin että sen vaiheen läsnäolo määritetään.

Yksinkertaisella suljetulla muodolla neutrofiilien määrä on merkittävästi lisääntynyt - valkoiset verisolut, jotka ovat vastuussa bakteeri-infektion torjunnasta. Promyelosyyttejä esiintyy - kypsymättömiä leukosyyttisoluja, joita yleensä ei tapahdu.

Pitkä, kova virtaava, keuhkotuberkuloosi liittyy degeneratiiviset muutokset neutrofiileissä, patologisen rakeisuuden muodostuminen. Eosinofiilien määrä vähenee voimakkaasti. On lymfopenia - lymfosyyttien määrän väheneminen. Kaikki nämä merkit viittaavat pitkittyneeseen tulehdusprosessiin, johon liittyy pussi ja nekroottiset massoitukset.

ESR muutos

Tuberkuloosin määrittäminen aktiivisessa vaiheessa auttaa ekologista tilannetta - indikaattori erytrosyyttien sedimentaatiokertoimesta. Immunoglobuliinien kerääntyminen, fibrinogeeni, edistää punasolujen saostumista ja nopeaa saostumista. Yleensä nämä veriparametrit miehillä eivät ole korkeammat kuin 10 mm / h, naisilla - 15 mm / h. ESR: n nopeus jopa 80 mm / h ilmaisee tulehdusprosessin aktivointia kehossa.

Ominaisuudet indikaattoreissa lapsilla

Lapsen tuberkuloosin veritesti ei ole paljon erilainen kuin aikuisen muutokset. Tuloksen dekoodaus suoritetaan samoilla indikaattoreilla:

  • Taudin alkuvaiheessa erytrosyyttien kaava muuttuu hieman. Anemia voi tapahtua vain tuhoisassa muodossa. Muissa tapauksissa punasolujen määrä pysyy ennallaan, kun taas kypsymättömien punasolujen määrä kasvaa. Lasten tuberkuloosia voidaan epäillä, kun retikulosyyttien havaitaan yli 1 ppm.
  • Myös leukosyyttien indikaattorit muuttuvat. Leukosytoosi kehittyy - neutrofiilien aiheuttama valkosolujen kokonaismäärän kasvu ja lymfosyyttien määrä vähenee jyrkästi. Lapsilla yli 6-vuotiaiden 40%: n normissa tuberkuloosin lymfosyyttien määrä on enintään 20%.

Taudin alkuvaiheissa kasvaa eosinofiilien määrä - solut, jotka reagoivat allergiseen reaktioon. Näiden voimakas väheneminen osoittaa, että prosessi siirtyy aktiiviseen vaiheeseen.

  • Lapsilla ESR ei ylitä 10 mm / h. Kiihtyvyys 50 mm / h: ssa osoittaa kehon vastustuskyvyn mobilisointia tulehdusprosessin torjumiseksi.

Lapsessa taudin alkuvaihe esiintyy usein ilman ilmeisiä oireita tai ARVI on peitossa.

Muutokset taudin asteesta riippuen

Voidaanko luotettavasti todistaa tuberkuloottisen tarkkailun läsnäolo laboratorion verikokeilla? Valitettavasti ei. Täydellinen verenlaskeminen tuberkuloosille pystyy havaitsemaan tulehdusprosessin vain tiettyjen sairausvaiheiden aikana.

  1. Infiltraatiovaiheessa leukosyytit reagoivat hieman ja ESR kasvaa.
  2. Hajoamisvaiheessa ilmenee leukosyyttisen kaavan ja erytrosyyttien voimakasta muutosta.
  3. Levinneet muodot analyysin aikana antavat aiempaa suurempia poikkeamia.
  4. Kun tulehdusprosessi heikkenee tai elpymisprosessi palaa, punainen veri palaa normaaliksi, leukosyyttien määrä ja suhde palautuu.
  5. Keuhkotuberkuloosin ei-aktiivista muotoa ei havaita yleisellä veritutkimuksella.

Tuberkuloosin varhainen havaitseminen tulee avain onnistuneeseen hoitoon, ja täydellinen veren määrä on menetelmä, joka mahdollistaa piilevän tulehdusprosessin havaitsemisen ajoissa. Vaikka analyysiä ei pidetä erityisenä tutkimusmenetelmänä, on mahdollista kattaa suuri joukko ihmisiä lyhyessä ajassa. Tyypillisen kliinisen kuvan poikkeavuuksien havaitsemisessa määrätään tuberkuloosin ja fluorograafin erityinen analyysi.

Kuka sanoi, että on mahdotonta parantaa tuberkuloosia?

Sinulla on diagnosoitu tuberkuloosi. Sinä täytät kaikki lääkärin määräykset, mutta ei ole toipumista. Kourallinen pillereitä vahingoittaa vatsaa, pyrkii heikkoutta ja apatiaa? Ehkä sinun pitäisi muuttaa hoidon lähestymistapaa.

Lääkärit eivät voi voittaa sairauden perimmäisiä syitä. Lue tarina Helenistä, joka onnistui voittamaan tuberkuloosin mitä tahansa. Lue artikkeli >>

ESR: n indikaattorit tuberkuloosissa

Tilastojen mukaan tuberkuloosi on yleisimpiä ihmisten sairauksia. Useimmiten tämä sairaus vaikuttaa lapsiin ja köyhille. On syytä huomata, että vuosittain sairastuneiden osuus on kaksinkertainen. Tässä yhteydessä kehitetään uusia lääkkeitä ja menetelmiä tuberkuloosin hoitoon.

Tärkein tekijä tuberkuloosin kehittymiselle on immuniteetin väheneminen, joka voi aiheutua ympäristön saastumisesta. On mahdollista diagnosoida tämä tauti testien avulla ja monilla muilla tavoilla.

Tuberkuloosin veritesti on pääasiallinen indikaattori ihmisen taudin määrittämiseksi. Tuberkuloosi on vaarallinen tartuntatauti. On syytä huomata, että sairauden kehittyneemmässä vaiheessa on erittäin vaikea hoitaa, joten on erittäin tärkeää havaita sairaus ajoissa ja aloittaa sairaalahoito asianmukaisesti.

Tuberkuloosin torjuntakeinoja

Taudilla on ilmassa oleva siirtomekanismi. Täten infektio voi tapahtua seurauksena siitä, että taudinaiheuttaja saapuu elimistöön limakalvon läpi. Lisäksi tuberkuloosi voidaan siirtää sairaalta äidiltä kehittyvään sikiöön.

Lähes kaikissa tapauksissa tuberkuloosi vaikuttaa hengityselimiin. Erota sairauden ylimääräinen muoto (vaikuttaa ruoansulatuskanavaan, keskushermostoon, häiritsee visuaalista toimintaa, nivelet, urogenitaalinen systeemi).

Tärkein sairauden lähde on mycobacterium - Kochin sauva. Se vaikuttaa keuhkoihin, ihoon, luihin ja muihin elimiin. Tyypillisesti tuberkuloosi voi johtaa vammaisuuteen tai jopa kuolemaan. Kuitenkin, jos tauti diagnosoidaan mahdollisimman varhaisessa vaiheessa, se on melko hyvin hoidettavissa.

ESR: n indikaattorit tuberkuloosissa

Verikoke tuberkuloosin määrittämiseksi osoittaa tulehdusprosessin kliinisen kulun. Tavallisesti erytrosyyttien sedimentaatioaste on: miehillä 1-10 mm / h naisilla 2-15 mm / h.

Taudinaiheuttaja, joka tulee ihmiskehoon, aiheuttaa vahinkoa erilaisten järjestelmien kudoksille ja elimille. Sisältää verenlaskennan muutokset. Niinpä silloin, kun tartunta on tarttuva, erytrosyyttien sedimentaatioaste on erittäin voimakas. Myös leukosyyttien määrä kasvaa, koska kehossa on tulehduksellinen prosessi.
Tuberkuloosi ei yleensä aiheuta merkittäviä muutoksia punasoluissa. Pienen anemian ja alhaisen hemoglobiinin kehittyminen voi kehittyä vain merkittävällä verenhukolla. Täten tuberkuloosiin liittyy ylimääräinen ESR, joka on merkittävästi korkeampi kuin normaaliarvo.

oireet

Tuberkuloosin tärkeimmät oireet ovat:

  1. Lisääntynyt kehon lämpötila;
  2. Yöhikoilu;
  3. Ilmavaivat;
  4. Kuiva, voimakas yskä ysköksellä (saattaa esiintyä veriväreitä);
  5. Yleinen väsymys;
  6. Dramaattinen laihtuminen;
  7. Nopea väsymys;
  8. uupumus;
  9. aggressiivisuus;
  10. Ruokahaluttomuus;
  11. Rintakipu.

Lapset, toisin kuin aikuiset, ovat eniten alttiita tuberkuloosille. Siksi on tarpeen tutkia säännöllisesti lapsesi ja suorittaa koe Kochin tikkujen tunnistamiseksi. Oikea-aikaisen diagnoosin ansiosta voit saavuttaa positiivisen tuloksen ilman vakavia seurauksia.

Joillakin ihmisillä on vahva immuunijärjestelmä. Tällöin taudin oireet alkavat näkyä vasta myöhemmässä vaiheessa. Kun immuniteetti heikkenee, oireet ilmenevät taudin alkuvaiheessa.
Tuberkuloosi kehittyy hitaasti ja asteittain:

  • Ensisijainen muoto.
    Kehittyy heti infektion jälkeen. Tärkeimmät oireet tässä vaiheessa ovat turvonnut imusolmukkeet.
  • Latentti (piilevä muoto).
    Taudin puhkeaminen on ominaista oireiden puuttuessa. Lisäksi ne esiintyvät erityisinä kipuina, kun hengitys ja yskä, ruokahaluttomuus, lisääntynyt hikoilu ja nopea väsymys. Tätä lomaketta voidaan pitää tarttumattomana.
  • Avaa lomake.
    Vakavin taudin muoto. Hoitoa varten on tarpeen suojata sairas henkilöltä muilta suljetuilta lääketieteellisiltä laitoksilta. Näin varmistetaan ympäröivien ihmisten turvallisuus.
  • Toissijainen muoto.
    Havaittu uudelleen tartunnan seurauksena.

Tuberkuloosin diagnosointi

Taudin toteaminen on monimutkaista johtuen kroonisen bronkiitin ensimmäisten oireiden samankaltaisuudesta. Tärkein rooli tuberkuloosin diagnosoinnissa on mahdollisten potilaiden testien oikea-aikaisuus. Joten jos potilaalla epäillään olevan tuberkuloosia, suoritetaan jäniksen tutkimus. Tätä varten ysköstä kerätään päivän aikana ja lähetetään laboratoriolle mykobakteerien havaitsemiseksi.

On huomattava, että tuberkuloosin diagnoosilla on muitakin menetelmiä potilaiden tutkimiseen.

Tehokkaimmat tapoja diagnosoida taudin ovat:

  1. B / x verikoke;
  2. Virtsaanalyysi;
  3. Yskösanalyysi;
  4. Mantoux-testi, Pirque;
  5. CT (laskennallinen tomografia);
  6. Serologiset verikokeet (ELISA, PCR);
  7. bronkoskopia;
  8. biopsia;
  9. Keuhkopussin puhkaisu;
  10. rintakehän röntgenkuva;
  11. Läpivalaisu.

On syytä huomata, että tuberkuloosiin liittyy kolesterolin, lysotsyymin, virtsahapon ja Cu: n konsentraation lisääntyminen veriseerumissa. Tämän perusteella kaikki tuberkuloosin muutokset voivat olla hyvin tarkkoja.

Jokainen sairauden muoto eroaa tietysti, vaikeusasteella, diagnoosilla ja hoidolla. Siksi kun ensimmäiset oireet ilmestyvät, sinun on välittömästi neuvoteltava lääkärin kanssa, äläkä itse lääkitä. Koska voit vain pahentaa tilannetta ja pahentaa tilanne.

Tällä hetkellä on olemassa monia lääkkeitä, jotka tehokkaasti taistelevat tuberkuloosin aiheuttajaksi. Johtava rooli henkilön elpymisessä on ajankohtainen diagnoosi ja pätevä terapia. Myös potilaan yleinen tila riippuu sairauden jälkeisestä palautumisprosessista. Joten, jos noudatat kaikkia lääketieteellisiä suosituksia, voit vähentää uudelleen tartunnan vaaraa.

Tuberkuloosin laboratoriodiagnoosi

Tuberkuloosi on sairaus, joka on helppo diagnosoida nykyisissä olosuhteissa ja tieteellisissä saavutuksissa. Tuberkuloosin laboratoriodiagnoosi on keskeinen muissa diagnostisissa menetelmissä, toisin kuin vain röntgenmenetelmissä.

Täydellinen verenkuva

Tuberkuloosipotilailla muutokset yleisessä verikokeessa eivät ole patognomoneja. Tuberkuloosin rajoitetuilla ja ei-aktiivisilla muodoilla erytrosyyttien hypochromia on tyypillistä niiden normaalille lukumäärälle. Massiivisten infiltraattien tai keuhkosyöpäpotilailla, joilla on laaja tapauksellinen lymfadeniitti, havaitaan erityisiä suolen vaurioita sekä suuria keuhko- tai postoperatiivisia verenvuotoja, erytropeniaa ja mikroytytoosia, oligo- kromaasia ja polykromaasia. Makrocytoosi ja vieläkin enemmän poikilosytoosi on paljon harvinaisempi, tavallisesti vaikean anemian yhteydessä. Tuberkuloosin kompensoidun retikulosyyttien määrä vaihtelee 0,1-0,6%, kun taas subkompensoidaan - 0,6-1,0% ja 1% retikulosyytteistä on tyypillistä dekompensoidulle.

Tuberkuloosissa on havaittavissa kohtalaista leukosytoosia (jopa 15 tuhatta leukosyyttiä), harvemmin leukopeniaa, joka esiintyy 2-7 prosentissa potilaista, joilla on rajoitettu ja helposti kehittyvä prosessi ja 12,5% - tuhoavaa ja progressiivista keuhkotuberkuloosia..

Useimmiten siirtymät esiintyvät leukosyytti-kaavassa. Huomataan sekä suhteellinen että absoluuttinen neutrofilia, kohtalainen leukosyyttien siirtyminen vasemmalle promyelosyytteihin. Yksinkertaisen tuberkuloosin tapauksessa myelosyyttejä esiintyy hyvin harvoin. Neutrofiilien määrän lisääntyminen patologisella rakeisuudella tuberkuloosin potilaan hemogrammissa osoittaa aina prosessin kestoa: vaikeissa tuberkuloosissa potilailla lähes kaikki neutrofiilit sisältävät patologista rakeisuutta. Kun tuberkuloottinen puhkeaminen lakkaa, ydinase siirtyy normaaliksi suhteellisen nopeasti. Neutrofiilien epänormaali rakeisuus kestää tavallisesti pidempään kuin muut muutokset hemogramissa.

Eosinofiilien sisältö ääreisveressä vaihtelee myös prosessin vaiheen ja kehon allergisen tilan mukaan. Niiden määrä vähenee aneosinofiliaan taudin vakavien ja pitkittyneiden taudinpurkausten aikana ja päinvastoin lisääntyy infiltraattien ja keuhkopussin tulehduksen resorptiolla sekä primaarisen tuberkuloosin varhaisilla muodoilla.

Suurin osa primaarisen tuberkuloosin muodoista seuraa lymfopenia, jota esiintyy joskus useiden vuosien ajan myös erityisten muutosten jälkeen. Toissijainen tuberkuloosi akuutissa vaiheessa riippuen prosessin vakavuudesta voi seurata joko normaali määrä lymfosyyttejä tai lymfopenia.

Tuberkuloosiprosessin arviointitutkimuksista erityinen paikka on käytössä erytrosyyttien sedimentaationopeuden (ESR) määrittämisellä, joka on tärkeä tuberkuloosin prosessin arvioimiseksi ja sen aktiivisten muotojen tunnistamiseksi. ESR: n kasvu osoittaa patologisen prosessin (tarttuva-tulehduksellinen, märkivä, septinen, hemoblastoosi, Hodgkinin tauti jne.) Esiintyminen ja toimii sen vakavuuden indikaattorina. Normaalit ESR-indikaattorit eivät kuitenkaan aina osoita patologian puuttumista. Erythrosyyttien sedimentaatiota kiihdytetään lisäämällä globuliinien määrää veressä, fibrinogeeni, kolesteroli ja veren viskositeetin lasku. Lymfosyyttien sedimentaation hidastuminen on tyypillistä hemokoncentraatioon, albumiinin ja sappihapojen määrän kasvuun.

Hemogrammi potilailla, joilla on tuberkuloosi, muuttuu hoidon aikana. Hematologiset muutokset katoavat nopeammin ja menestyksekkäämpiin terapeuttisiin toimenpiteisiin. On kuitenkin otettava huomioon erilaisten antibakteeristen lääkkeiden hematopoieesia koskeva vaikutus. Ne aiheuttavat usein eosinofiliaa, joissakin tapauksissa - leukosytoosi, ja useammin leukopenia agranulosytoosiin ja lymfoidiharjoituksiin saakka. Järjestelmällinen hematologinen valvonta ja saadun tiedon oikea analysointi ovat välttämättömiä potilaan kliinisen tilan, prosessin dynamiikan ja käytetyn hoidon tehokkuuden arvioimiseksi.

urinalyysi

Virtsatiejärjestelmän tuberkuloosilla virtsatestaus on tärkein laboratoriodiagnostiikka. Voit tarkkailla leukosyyturiaa, erytrosyturiaa, proteinuriaa, hypoisistenturiaa, mycobacterium tuberculosisia, epäspesifistä bakteriuriaa.

Leukosytaasi on yleisimpi virtsajärjestelmän tuberkuloosin oire ennen spesifistä kemoterapiaa, ja se puuttuu vain poikkeustapauksissa, esimerkiksi ureterän lumen irtoamisen täydellisellä tavalla. Nechiporenko-testi (leukosyyttien lukumäärän määrittäminen 1 ml: ssa virtsasta) auttaa objektiivisesti arvioimaan leukosyyttien astetta nefrotuberkuloosissa ja joissakin tapauksissa tunnistamaan sen normaalissa virtsanäytteessä. On kuitenkin pidettävä mielessä, että leukosytourisuus voi olla akuuteissa ja kroonisissa pyelonefriitissa, kystiitti, uretriitti, kivet munuaisissa ja uretereissä.

Eritrotsiturii. kuten leukosyturia. Sitä pidetään yhtenä tavanomaisimmista virtsateiden tuberkuloosin laboratoriotiedoista. Hemuraasin esiintymistiheys riippuu prosessin esiintyvyydestä, ja se lisääntyy kehitettäessä tuhoavaa tuberkuloottista prosessia munuaisissa. Erythrocyturia ilman leukosyturiaa on tyypillisempää munuaisen tuberkuloosin varhaisvaiheissa. Leukosyturiaa hallitseva hematuria on tärkeä väite munuaisen tuberkuloosin hyväksi sen erilaistumisessa epäspesifisen pyelonefriitin kanssa.

Biokemiallinen veritesti

Tuberkuloosissa joidenkin biokemiallisten parametrien muutokset riippuvat pääasiassa prosessin vaiheesta, komplikaatioista ja erilaisista samanaikaisista sairauksista. Keuhkojen ja muiden elinten inaktiivisen tuberkuloosin potilailla veriseerumin kokonaisproteiini- ja proteiinifraktioita ei muuteta eikä niiden normaalia sisältöä ole määritetty.

Akuuttien sairauksien muodoissa sekä kroonisten tuberkuloosilääkkeiden pahenemisessa ja etenemisessä albumiini-globuliinin kerroin vähenee.

Olennaista arvioitaessa toiminnallista tilaa ja orgaanista tuhoa tuberkuloosiin ja sen komplikaatioihin on seerumin suora ja kokonaisbilirubiini, aspartaattiaminotransferaasi (ACT), alaniiniaminotransferaasi (ALAT) seerumia. Aminotransferaasien tason dynaaminen määritys. bilirubiini tuberkuloosipotilailla, erityisesti vakavissa muodoissaan, on pakollinen komponentti tuberkuloosin potilaiden biokemiallisessa tutkimuksessa ja se suoritetaan kuukausittain.

Munuaisten toiminnallisen tilan arviointiin kuuluu seerumin kreatiniinin määritys ja glomerulaarisen suodatusnopeuden laskeminen käyttäen Cockroft-Gault-kaavaa. Glomerulaarisuodatuksen nopeuden laskeminen Reberg-testillä antaa vähemmän tarkkoja tuloksia.

Tuberkuloosin potilaiden dynaamisten biokemiallisten tutkimusten päätavoitteena on kontrolloida prosessin kulkua, tunnistaa ajoissa lääkkeiden haittavaikutukset ja saada aikaan homeostaasin aiheuttamien häiriöiden riittävä korjaus.

Biokemiallisten tutkimusmenetelmien käyttö ylimääräiseen tuberkuloosiin

Tärkein indikaattori pitää tuberkuloosahappojen pitoisuutta biologisissa nesteissä, mutta sen määritelmä on täynnä teknisiä vaikeuksia (kaasukromatografian ja massaspektrometrian käyttö).

On lupaavaa mitata adenosiinidaminaasin aktiivisuutta, entsyymiä, joka havaitaan nesteissä: synovial, pericardial, ascitic tai aivo-selkäydinneste. Adenosiinideaminaasin tärkeimmät tuottajat ovat lymfosyytit ja monosyytit. Adenosiinidaminaasin aktiivisuuden määrittäminen biologisissa nesteissä helpottaa tuberkuloosin synovitisin, imusolmukkeiden tuberkuloosin, tuberkuloottisen aivokalvontulehduksen, tuberkuloosin serositiitin diagnoosia.

Eräitä biokemiallisia parametreja, jotka johtuvat niiden epäspesifisyydestä, määritetään vain biologisissa nesteissä, jotka ovat lähellä leesiota. Indikaattoreiden taso mitataan vasteena tuberkuliinin ihonalaiseen tai intrakaaniseen antoon (yleensä ennen antamista ja 48 ja 72 tunnin kuluttua sen jälkeen). Sen jälkeen lasketaan markkerin tason nousuaste (prosentteina) suhteessa alkuperäiseen tasoon.

Optimaalinen määritys virtsassa organispesifisen entsyymi-transamdininaasin aktiivisuudesta, jonka esiintyminen on havaittavissa erilaisista luontaisista munuaisvaurioista. Transaminidaasin tutkimus on perusteltua vain tuberkuliinin subkutaanisen käytön yhteydessä paikallisen tulehdusprosessin pahentamiseksi. Transamidinaasiaktiivisuus virtsassa määritetään lähtötilanteessa ja 24-72 tuntia 50 TE: n tuberkuliinin antamisen jälkeen. Fermenturian lisääntyminen kahdella kerralla ja enemmän mahdollistaa 82%: lla tapausten erottelemisen aktiivisen munuaisten tuberkuloosin erittymisestä kroonisen pyelonefriitin pahenemisesta.

Naisten sukupuolielinten tuberkuloosissa haptoglobiinin ja malondialdehydin pitoisuudet veressä määritetään provokatiivisessa tuberkuliinitutkimuksessa. Tuberkuliinia annetaan ihonalaisesti 50 TE: n annoksella ja 72 tunnin jälkeen suoritetaan toistuva biokemiallinen tutkimus. Tuberkuloottisen etiologian tapauksessa haptoglobiinipitoisuuden nousuvauhti on vähintään 28% ja malondialdehydin taso on 39% tai enemmän. Käytetään myös määritettäessä adenosiinideaminaasin aktiivisuutta Douglas-avaruudessa johdetusta peritoneaalisesta nesteestä. Punktiota tutkitaan uudelleen 72 tuntia tuberkuliiniannoksen antamista varten 0,1 TE: n ja 0,01 TE: n annoksina sisäisen sukupuolielinten projisointialueella anteriorisen vatsa-seinän kohdalla. Tuberkuloosiprosessin hyväksi adenosiinideaminaasin aktiivisuuden kasvu 10 prosentilla tai enemmän verrattuna alkuperäiseen on indikatiivinen.

Silmävaurioiden yhteydessä tutkitaan tarkkailua, joka tapahtuu silmässä antigeenisen stimulaation vasteena. Samaan aikaan ei-toivottua kehitystä voimakasta vastausta, johon liittyy visuaalisten toimintojen väheneminen. Koska minimaalisten polttoreaktioiden arvioiminen on usein vaikeaa, objektiivinen päätelmä, on suositeltavaa keskittyä samanaikaisesti seerumin haptoglobiinin tai adenosiinideaminaasin lisääntymisasteeseen.

Kaikki biokemialliset tutkimukset on suoritettava yhdessä muiden menetelmien kanssa.

Veren koagulointitesti

Relevanssi Tutkimuksen tilan veren hyytymiseen TB johtuu läsnäolo useita potilaita, joilla on keuhkotuberkuloosi veriyskökset tai keuhkojen verenvuoto sekä hemocoagulation komplikaatioita leikkaushoitoa tuberkuloosin. Lisäksi latentti intravaskulaarinen hemokoagulaatio, joka on luonnostaan ​​samanaikainen tuberkuloosin kanssa, vaikuttaa taudin kulkuun ja kemoterapian tehokkuuteen.

Potilailla, joilla on keuhkoputken tuberkuloosi, joka on pääosan tulehduksen eksudatiivinen komponentti, havaitaan veren antikoagulanttiaktiivisuuden vähenemistä. Potilailla, joilla on vähäinen esiintyvyys spesifisen tulehduksen esiintymisessä keuhkoissa, joiden tulehduksen tuottava komponentti on suurimmillaan, intravaskulaarinen hemokoagulaatio ei ole kovin voimakasta. Potilaille, joilla on keuhkotuberkuloosi ja Veriyskä ja keuhkojen verenvuoto tila veren hyytymiseen on erilainen: potilailla, joilla on alhainen veren menetys korkeudella gemoptoe tai välittömästi sen päätyttyä on jyrkkä nousu veren hyytymisen kyky johtuvat vakavista tehostuminen trombinoobrazovaniya säilyttäen lisääntynyt "rakenteellinen" hyytymistä. Potilailla, joilla on suuri verenhukka, koagulaatiopotentiaalin väheneminen havaitaan fibrinogeenipitoisuuden vähenemisen vuoksi. tekijä XIII: n aktiivisuus, verihiutaleiden määrä. Kirurgisen hoidon vaiheessa potilailla, joilla on rajoitetusti keuhkotuberkuloosia, homeostaasi-järjestelmällä ei ole merkittäviä häiriöitä. Potilaat, joilla on yhteisiä prosesseja pneumonimyrkkyä tai pleuropneumonectomiaa käytettäessä, kehittävät usein DIC: ää, joka voi olla "toisen taudin" muoto.

Seurattaessa veren hyytymistä potilailla, joilla on keuhkotuberkuloosi olisi suoritettava määritys aktivoitua osittaista tromboplastiiniaikaa (aPTT), fibrinogeeni, trombiini aika, protrombiini indeksi ja vuotoaikaan ja hyytymisaika.

Hormonaaliset tutkimukset

Nykyaikaiset kokeelliset ja kliiniset havainnot osoittavat, että spesifisen keuhkokuumeen hormonaalisen tilan muutokset tapahtuvat. On osoitettu, että korjaus toimintahäiriön aivolisäke-lisämunuaisen, aivolisäkkeen-kilpirauhasen järjestelmien ja haiman toiminta yhdessä anti-TB hoito edistää aktivointi fibrogeneesiä ja korjaus kasvupaikalla erityinen tulehdus.

Aivolisäkkeen ja kilpirauhasen järjestelmän funktionaalinen tila arvioidaan triodi-tyroniinin seerumissa (T3), tyroksiini (T4), kilpirauhasen stimuloiva hormoni aivolisäke (TSH). On todettu, että 38-45%: lla potilaista, joilla on keuhko tuberkuloosi, havaitaan subkliininen kilpirauhasen vajaatoiminta, ja se tunnistetaan useimmiten prosessin levinneissä ja kuitujaukoissa. Näissä samoissa muodoissa T-tasot ovat voimakkaimmin vähentyneet.3,niin ja t4, ja näiden hormonien epätasapaino kasvaa suhteessa T kasvattaen4/ Ts.

Lisämunuaisen aivokuoren toiminta arvioidaan verisolumäärän kortiolin määrällä ja haiman hormonitoiminnalla immuuni-reaktiivisen insuliinin pitoisuudella. Tarttuvan taudin akuutissa vaiheessa endogeenisen kortisolin ja insuliinin tarve kasvaa. Hyperinsulinemia viittaa myös kehon kudosten insuliiniresistenssiin, joka on ominaista minkä tahansa aktiivisen tulehdusprosessin, erityisesti spesifisen. Lisäkilpirauhasen glukokortikoiditoiminnan määrittäminen aktiivisella keuhko tuberkuloosilla paljastaa hyperkorttisyyden esiintymisen useimmilla potilailla. Normaali kortisolin pitoisuuden veressä potilaan kanssa tarttuvan tulehduksen akuutin aikana olisi pidettävä suhteellisen epäonnistumisen glukokortikoidin toiminta ja lisämunuaisen kuoren, joka voi toimia perustana, jolla annosten riittävä korvaushoito glukokortikoidien.

Lähes kolmannes potilaista, joilla on keuhko tuberkuloosi, voidaan todeta, että niiden insuliiniviniataso on melko alhainen ja lähestyy normaalin alarajaa, kun taas 13-20% näkee merkittävää hyperinsulinismia. Sekä suhteellinen hypo- että hyperinsulinismi ovat suuria riskitekijöitä erilaisten hiilihydraattien metaboliahäiriöiden kehittymiselle. Nämä muutokset haiman B-solujen toiminnallisessa aktiivisuudessa edellyttävät säännöllistä glykeemista kontrollointia potilailla, joilla on tuberkuloosi ja diabetes on ennaltaehkäisevä. Lisäksi. Tämä toimii lisäperusteena insuliinin fysiologisten annosten käytölle tuberkuloosin monimutkaisessa hoidossa.

Yleensä kilpirauhashormonipitoisuuksien lasku, niiden epätasapaino, hyperkortisolemia ja hyperinsulinismi ovat voimakkaimpia potilailla, joilla on vakava tuberkuloosi, laajoilla keuhkojen vaurioilla ja vakavilla tuberkuloosin myrkytysoireilla.

Tuberkuloosin mikrobiologinen diagnoosi

Mikrobiologiset tutkimukset ovat välttämättömiä potilaiden tuberkuloosin toteamiseksi, kemoterapian diagnosoinnin, seurannan ja korjaamisen tarkastamiseksi ja hoidon tulosten arvioimiseksi eli potilaan tuberkuloosin rekisteröinnin hetkellä, kunnes se on poistettu rekisteristä.

Kaikki epidemiologiset ohjelmat ja hankkeet perustuvat arvioon bakteerien eritteestä, jota ei voida tehdä ilman laboratoriomenetelmiä mycobacterium tuberkuloosin toteamiseksi. Tutkittaessa ns. Organisoitumattoman populaation negatiivisuutta bakteeriperäisten bakteerien prosenttiosuus on 70 tai enemmän, mikä tekee laboratoriomenetelmistä varsin tehokkaan keinon identifioida potilaat, joilla on tuberkuloosi, tämän väestöryhmän keskuudessa.

Perinteiset mikrobiologiset menetelmät tuberkuloosin - bakterioskooppisten ja kulttuuristen tutkimusten diagnosoinnille. Nykyaikaiset menetelmät pitävät mykobakteerin tuberkuloosin viljelyä automaattisissa järjestelmissä, PCR. Kaikki nämä menetelmät kuitenkin välttämättä yhdistetään klassisiin bakteriologisiin menetelmiin.

Diagnostiikkamateriaalin kokoaminen

Laboratoriotutkimusten tehokkuus riippuu pitkälti diagnostisen aineiston laadusta. Diagnostiikkamateriaalin keräämistä, tallentamista ja kuljettamista koskevien sääntöjen noudattaminen ja potilaan tutkimiseen tarkoitetun algoritmien tarkka täytäntöönpano vaikuttavat suoraan tulokseen ja takaa biologisen turvallisuuden.

Tuberkuloosin tutkimukseen, joka käyttää erilaisia ​​materiaaleja. Johtuu siitä, että TB logkih- yleisin muoto tuberkuloottinen vaurioita, perusmateriaali tutkimuksen harkita yskös ja muita irrotettavia trakeobronkiaalisen: ylempien hengitysteiden eritteissä jälkeen saatu aerosoli on hengitetty: keuhkoputken pesut; bronchoalveolar huuhtelut; aineesta, joka on saatu bronkoskopialla, transtrakealisella ja intrapulmonaalisella biopsialla: aspirata keuhkoputkista, kurkunpäänsärsyt, eksudat, haavaumat, jne.

Tutkimuksen tehokkuus kasvaa, jos ne suorittavat potilasta valvotun kokoelman materiaalia. Voit tehdä tämän jakamalla erityisen huoneen tai hankkimalla erityisiä mökkejä. Aineiston keruu on vaarallinen menettely, joten sinun on kerättävä materiaalia tutkimukseen tartuntatautien sääntöjen mukaisesti.

Mycobacterium tuberculosis -valmisteen materiaali kerätään steriileihin injektiopulloihin tiukasti kiertyneillä korkkeilla ympäristön saastumisen estämiseksi ja kerättyjen aineiden suojaamiseksi kontaminaatiolta.

Diagnostiikkamateriaalin keräyspullot täyttävät seuraavat vaatimukset:

  • on valmistettava iskunkestävästä materiaalista;
  • pitäisi sulaa helposti autoklaavissa;
  • on riittävä tilavuus (40-50 ml):
  • on laaja aukko ysköksen keräämiselle (halkaisija vähintään 30 mm);
  • helppoa, läpinäkyvää tai läpikuultavaa, jotta voit arvioida kerätyn näytteen määrän ja laadun avaamatta kansiasi.

Optimaalisten tutkimustulosten saavuttamiseksi on täytettävä seuraavat ehdot:

  • aineen keruu tapahtuu ennen kemoterapian aloittamista;
  • tutkimuksen aineisto on kerättävä ennen elintarvikkeiden ja huumeiden aamunottoa;
  • tutkimusta varten on toivottavaa kerätä vähintään kolme aamuniveltä. Kerää yskää 3 peräkkäisen päivän ajan;
  • Kerätty materiaali on toimitettava laboratoriolle mahdollisimman pian:
  • siinä tapauksessa, että aineistoa ei voida toimittaa välittömästi laboratorioon, se säilytetään jääkaapissa 4 ° C: n ilman lämpötilassa enintään 48 tuntia;
  • aineen kuljetuksessa on välttämätöntä tarkkailla injektiopullojen eheyttä.

Oikein kerätyllä kyyhkyllä ​​on limakalvo tai limakalvo. Tutkimuksen kohteena olevan yskän optimaalinen tilavuus on 3-5 ml.

Löyhtäys on kerätty lääkärin valvonnassa. Yhtymän keräämisestä vastaavien henkilöiden on valvottava tiettyjen sääntöjen täytäntöönpanoa:

  • Potilaalle on tarpeen selittää tutkimuksen tarkoitus ja tarve lievittää sylkeä tai nenänien limaa, mutta syvän hengitysteiden sisältöä. Tämä voidaan saavuttaa tuloksellisen yskän aiheuttaman muutaman (2-3) syvän hengityksen jälkeen. On myös varoitettava potilasta, että hänen on ensin huuhdeltava suunsa kiehuvalla vedellä poistaakseen kasvua aiheuttavan mikrofloorumin pääosan suuontelossa ja ruhon roskista, jotka estävät yskän tutkimisen;
  • kynnen keräämiseen osallistuva terveydenhuollon työntekijä, vaatekappaleen ja korkin lisäksi, on käytettävä maski, kumihansikkaat ja kumiseten esiliinat;
  • seisoo potilaan takana, hänen on suositeltavaa pitää pullo mahdollisimman lähelle huulet ja erottaa välittömästi ysköön, kun se yskää, kun taas on välttämätöntä varmistaa, että ilmavirta ohjataan terveydenhuollon tarjoajalta:
  • Ymmärryksen loppuun saattamisen jälkeen lääkärin on suljettava injektiopullo varovasti korkilla ja arvioitava kertyneen ysköksen määrä ja laatu. Sitten pullo leimataan ja asetetaan erityiseen boksiin kuljetettavaksi laboratoriolle.

Jos potilas ei emittoi yskää, silloin aamupäivällä ja aamupäivällä aineen keräämispäivänä tulisi antaa ekspektorinaine: Altea-lääkkeen uute (muktatiini), bromheksiini, ambroksoli jne. - tai ärsyttävä inhalaatio käyttäen keräilyhuoneeseen asennettua laitetta yskös. Näin menetettyä materiaalia ei voida säilyttää, ja sitä on tarkasteltava keräyspäivänä. Jotta vältetään hänen "hylkäämisen" laboratorio suuntaan pitäisi tehdä erityinen merkki.

Jos mikrobiologista tutkimusta ei suoriteta tässä laitoksessa, kerätty diagnostinen materiaali on toimitettava keskitetysti laboratorioon edellyttäen, että materiaalin pakollinen säilyttäminen jääkaapissa tai säilöntäaineiden käytön välityksellä. Toimitetaan materiaali laboratoriossa helposti hajoavissa laatikoissa. Jokaisen näytteen on oltava merkitty sopivalla etiketillä, ja koko erä on täytettävä oheisella lomakkeella.

Potilaiden tutkimuksen tavat ja esiintymistiheys

Potilaan ensimmäisen, ns. Diagnosoinnin, tuberkuloosin tutkimista varten on tarpeen tutkia vähintään 3 annosta ysköstä kahden tai kolmen päivän kuluessa. kerätään lääketieteellisen henkilöstön valvonnassa, mikä lisää mikroskopian tehokkuutta.

Ensisijaisen tuberkuloosin seulonnan tulisi suorittaa kaikki terveydenhuollon lääketieteellisen diagnoosilaitoksen laitokset. Viime aikoina primaaritarkastuksen tehokkuuden lisäämiseksi kliinisten diagnostisten laboratoriotutkimusten perusteella järjestettiin ns. Mikroskooppikeskuksia, jotka on varustettu moderneilla mikroskoopilla ja välineillä epidemian turvallisuuden varmistamiseksi.

TB: n laitoksissa käytetään seulontaohjelmaa, johon kuuluu yskän tai muun diagnostisen aineen tutkimus vähintään 3 kertaa 3 päivän kuluessa. Hoidon aikana mikrobiologiset tutkimukset suoritetaan säännöllisesti, vähintään kerran kuukaudessa intensiivisen kemoterapian vaiheessa. Seurantavaiheeseen siirtymisen aikana tutkimuksia tehdään harvemmin - 2-3 kuukauden välein, kun taas tutkimuksen moninaisuus pienenee kahteen.

Diagnostiikkamateriaalin keräämisen ominaisuudet extrapulmonaalisessa tuberkuloosissa

Patologisen aineen erityispiirteet tuberkuloosin erikoispotilailla ovat vähäinen mycobacterium tuberculosis -konsentraatio, joka vaatii herkempiä mikrobiologisten tutkimusten menetelmiä, ennen kaikkea ravinneväliaineiden istuttamismenetelmiä.

Urogenitaalisessa tuberkuloosissa virtsa on kaikkein helpoin tutkimusmateriaali. Virtsanäytteenoton tulisi tehdä koulutettu sairaanhoitaja.

Ulkopuoliset sukupuolielimet pestään saippualla ja vedellä tai heikolla kaliumpermanganaatin liuoksella. Huolehdi huolellisesti virtsaputken ulkoisesta avautumisesta. Keskivaikea aamuurniini kerätään steriiliin injektiopulloon: miehillä - luonnollisesti naisilla - katetrilla. Munasarjasta virtsaan kerätään steriilejä putkia yksi tai kaksi munuaisten katetrointiin, jälkimmäisessä tapauksessa - aina erikseen jokaisesta munuaisesta. Pieni määrä tätä virtsaa sentrifugoidaan, sakka tutkitaan.

Miesten, siemennesteen, punsetaattien, eturauhasen eritteet sentrifugoidaan sedimentin saamiseksi. Missä tahansa miesten spesifisessä prosessissa sukupuolielinten alueella, eturauhasen hieronta voi vaikuttaa tuberkuloosin mykobakteerin eritykseen, joka sisältää eritteitä.

Kuukautisverta kerätään naisista imulla tai käyttämällä Kafka-korkkia. Tuloksena oleva materiaali vapautuu punasoluista, pestään tislatulla vedellä, minkä jälkeen sentrifugoidaan. Sedimentti tutkittiin.

Koiran kohdunkaulan kanavasta purkautuminen kerätään kaikkiin Kafkan säiliöihin tai korkkiin, eli on toivottavaa kerätä 1-2 ml patologista materiaalia.

Munuaisten, sukupuolielinten leikkauksen aikana saadut materiaalit. biopsiat, limakalvot endometriumista, homogenoidut. Tätä varten se sijoitetaan steriiliin laastiin ja murskataan perusteellisesti steriileillä saksilla. Tulokseksi saatuun suspensioon lisätään sterilejä hiekkaa määränä, joka on yhtä suuri kuin sen massa, lisätään 0,5-1,0 ml isotonista natriumkloridiliuosta ja koko jauhetaan tahnamassan muodostamiseksi lisäämällä isotonista natriumkloridiliuosta (4-5 ml). Sitten massan annetaan laskeutua 1-1,5 minuutin ajan, supernatantti tutkitaan.

Luiden ja nivelten tuberkuloosi. Steriloidulla ruiskulla saatava täplätti (pussi abscess abscesses) sijoitetaan steriiliin säiliöön ja välittömästi toimitetaan laboratoriolle. Steriiliä isotonista natriumkloridiliuosta esikäsiteltyä steriiliä pipetillä kestää 2-5 ml pusetta, siirretään pulloon helmillä ja lisätään vielä 2-3 ml isotonista natriumkloridiliuosta. Pullo suljetaan pysäyttimellä ja ravistellaan huijauslaitteessa 8-10 minuuttia. Homogenoidun lietteen tutkitaan.

Osteo-nivelten tuberkuloosin fistulaarisia muotoja varten pussi otetaan fistolista. Runsas purkaus kerätään suoraan putkeen. Vähäisen pussien purkautumisen yhteydessä fisteli pestään steriilillä natriumkloridin isotonisella liuoksella ja pesussa, joka kerätään testiputkeen tai pussiin pussiin tamponiin, lähetetään tutkimukseen.

Luu- ja nivelten leikkauksen aikana saatava kirurginen materiaali voi koostua märkä-nekroottisista massoista, granulaatiosta, arpeesta, luukudoksesta, nivelkalvojen kudoksista ja muista substraateista. Se käsitellään munuais tuberkuloosin tapaan.

Synovial-nesteiden mikrobiologista tutkimista 3-prosenttisessa natriumsitraattiliuoksessa (1: 1 suhde) hyytymisen estämiseen suoritetaan välittömästi lävistyksen jälkeen.

Imusolmukkeiden tuberkuloosi. Myös imusolmukkeiden puhkeamisen aikana uutettu pussi tutkitaan. kuin suolen paiseiden pus. Leikkauksen aikana saatuja imusolmuke kudoksia, biopsiat, tutkitaan kuten muissa tuberkuloosimuodossa.

Mycobacterium tuberculosis -valmisteiden ulosteiden tutkimus on erittäin harvinaista, koska positiivisten tulosten lähes täydellinen puuttuminen johtuu.

Mikroskopian mykobakteerit

Yskösmikroskopia on suhteellisen nopea, yksinkertainen ja edullinen menetelmä, jota tulisi käyttää kaikissa epäillyn tuberkuloosin tapauksissa. Lisäksi tämä tutkimus suoritetaan kemoterapian tehokkuuden arvioimiseksi ja elpymisen tai epäonnistuneen hoitotuloksen saavuttamiseksi ilman viljelyn tuloksia.

Käytä 2 mikroskopista tutkimusta:

  • suora mikroskopian menetelmä, kun tahra valmistetaan suoraan diagnostisesta materiaalista;
  • joka on valmistettu dekontaminoituneesta materiaalista viljelmälle.

Ensimmäistä menetelmää käytetään laboratorioissa, joissa suoritetaan vain mikroskooppisia tutkimuksia (yleisen lääketieteellisen verkon kliiniset diagnostiset laboratoriot).

Mikroskooppisen tutkimuksen parhaat tulokset saadaan keskittymällä diagnostiseen materiaaliin (esimerkiksi sentrifugoimalla).

Mycobacterium tuberculosisin havaitsemiseksi 50 prosentin mahdollisella mikroskopialla 1 ml: n ysköksen tulisi sisältää yli 5 000 mikrobisolut. Tuberkuloosin keuhkotyyppisten potilaiden vatsavaivat sisältävät tavallisesti merkittävän määrän haponkestäviä bakteereja, joiden avulla he voivat luottamuksellisesti tunnistaa ne bakterioskopian aikana. Tämän menetelmän diagnostista herkkyyttä voidaan parantaa tarkastelemalla useita ysköksenäytteitä yhdestä potilaasta. Negatiivinen bakterioskopia ei sulje pois tuberkuloosin diagnoosia, koska eräiden potilaiden yskökset sisältävät vähemmän mykobakteereja kuin mikroskoopilla voidaan havaita. Huonon valmistautuminen ysköksen tahroihin voi myös olla negatiivisen bakterioskooppisen tutkimuksen syy.

Yleisimpiä menetelmiä hapon nopeiden mykobakteerien havaitsemiseksi tahroina on väritys Ziehl-Nelsenin mukaan. Menetelmä perustuu karbiinifossiinin tunkeutumiseen mikrobisoluihin kalvon läpi, joka sisältää vaha-lipidikerroksen, jossa on samanaikaiset kuumennusvaikutukset ja fenolin voimakas etsausvaikutus. Seoksen myöhempi värjäytyminen 25-prosenttisella rikkihapon tai 3-prosenttisen suolahapon alkoholin kanssa johtaa kaikkien ei-haponkestävien rakenteiden värjäämiseen. Valkaistut likaiset elementit värjätään 0,3-prosenttisella metyleenisin- liuoksella. Mykobakteerit eivät näe tavallisia aniliiniväriaineita, joiden seurauksena happoa vastustavat mykobakteerit on maalattu vadelma-punaisella värillä ja muut mikrobit ja soluelementit - sinisellä.

Zilu-Nelsenillä värjättyjen seosten tutkimiseksi käytetään vaaleaa binokulaarimikroskooppia, jossa on upotusobjektiivi (90 tai 100 kertaa suurempi) ja okulaari, jossa on 7 tai 10 kertainen suurennus. Tarkastele 100 näkökenttää, mikä riittää tunnistamaan yksittäisiä mykobakteereja. Jos tällaisen tutkimuksen tulos on negatiivinen, kannattaa tarkastella 200 uutta katselukenttää. Merkitse tulokset, jotka osoittavat havaittujen happoa kestävien mykobakteerien (CUM) määrän.

Tämän tekniikan lisäksi fluorokromia käytetään fluoresenssimikroskopiaan, mikä mahdollistaa parhaat tulokset. Tämän menetelmän käyttö lisää mikroskopian tehokkuutta 10-15%. Kun käsitellään mykobakteerin luminoivien väriaineiden (auramiini, rodamiini jne.), Nämä aineet liittyvät myös mikrobisolun vahamaisiin rakenteisiin. Kun maalattu solu säteilytetään jännittävällä valonlähteellä (tietty spektri ultraviolettisäteilyä), ne alkavat hehkuttaa oranssinväristä tai kirkkaan punaista valoa mustaa tai tummanvihreää taustaa vasten. Suuren kirkkauden ja kontrastin ansiosta näkyvä kuva on mahdollista pienentää mikroskoopin suurennusta 4-10 kertaa, mikä laajentaa näkökenttää ja pienentää valmisteen katseluaikaa. Tämän lisäksi, koska syvyys on paljon suurempi, on mahdollista lisätä tutkimuksen mukavuutta.

Kun käytetään fluoresenssimikroskopiaa, kestää paljon vähemmän aikaa nähdä samasta pinta-alasta kuin Tsil-Nelsenillä värjätyistä tahrojen valomikroskoopista. Jos työpäivällä mikroskopisti näyttää läpi noin 20-25 tällaista tahraa, sitten käyttämällä fluoresenssimikroskopiaa, hän voi tutkia yli 60-80 näytettä samanaikaisesti. Kokeneet mikroskoopit tietävät, että solun värjäys auramiinin ja rodamiinin seoksella on jollain tavalla spesifistä haponkestäville mykobakteereille, joilla on tässä tapauksessa kultaisia ​​tikkuja. Saprofyytit ovat värillisiä vihreitä.

Toinen fluoresenssimikroskopian menetelmän tärkeä etu on kyky havaita muokatut mykobakteerit, jotka ovat menettäneet useita epäsuotuisia tekijöitä, erityisesti voimakasta kemoterapiaa, happovastuksen ominaisuutta eikä niitä havaita tässä yhteydessä Tsil-Nelsenillä värjättynä.

Fluoresenssimikroskopian haitat ovat mikroskoopin suhteellisen korkeat kustannukset ja sen toiminta. Keskitetyissä tai muissa suurissa laboratorioissa, joissa kuorma ylittää 3: n teknikon, joka työskentelee kolmen perinteisen mikroskoopin kanssa, on kuitenkin edullisempaa käyttää vain yhtä fluoresenssimikroskooppia.

Bakteeriskooppisilla menetelmillä on melko suuri spesifisyys (89 - 100%). Noin 97% positiivisista tuloksista, jotka on saatu mikroskoopilla, vahvistetaan yksiselitteisesti kylvämisen tuloksista.

On huomattava, että patologisen materiaalin tahran mikroskooppinen tutkimus ei pysty määrittämään tunnettujen haponkestävien mykobakteerien lajeja. Mikroskopian menetelmä antaa meille mahdollisuuden päätellä vain valmisteen sisältämien haponkestävien mikro-organismien läsnäolon tai poissaolon, mikä johtuu siitä, että suuri määrä tuberkuloosista ei-tuberkuloosista haponkestäviä mikro-organismeja, jotka ovat morfologisesti samanlaisia ​​kuin mykobakteerit, ovat luonteenomaisia.

Puolikvantitatiivisten yksiköiden tuottaman mikroskopian tulosten arviointi.

Voidakseen verrata eri mikroskopian menetelmien tuloksia esitellään empiirisiä kertoimia. Esimerkiksi fluoresoivien väriaineiden värjäämien tulosten vertailemiseksi valomikroskopiodatalla (1000 x suurennuksella) on välttämätöntä jakaa fluoresoivalla mikroskoopilla havaitut haponkestävien mykobakteerien määrä vastaavalla tekijällä mikroskoopin 250-kertaisella suurennuksella 10: llä 450-kertainen - 4, 630-kertaisesti - 2.

Mikroskopian ominaisuudet extrapulmonaalisessa tuberkuloosissa

Suoramikroskopia suoritetaan sekä väkevöinnin jälkeen valmistettu smearmikroskopia, jota seuraa Zill-Nelsen-värjäys tai luminesoiviset väriaineet. Suoramarkkamikroskopia on tehottomana johtuen mykobakteerien alhaisesta pitoisuudesta materiaalissa, ja siksi on järkevämpää käyttää rikastusmenetelmiä. Sentrifugointi on tehokkainta. Jos biologinen materiaali on viskoosia, käytetään sentrifugointia samanaikaisella homogenisoinnilla ja nesteytyksellä, joka suoritetaan käyttäen suurnopeusjäähdytysseoksia, joiden keskipakovoima on 3000 g ja hypokloriittiliuokset. Muita rikastusmenetelmiä, kuten mikroflotaatiota, ei tällä hetkellä käytetä biologisten vaarallisten aerosolien muodostumisen vuoksi.

Kulttuurimenetelmä tuberkuloosin diagnosoimiseksi

Siemennämenetelmä tai viljelymenetelmä on herkempi kuin kastamikroskopia, ja sillä on useita etuja verrattuna jälkimmäiseen. Sen avulla voidaan havaita useita kymmeniä elinkelpoisia mykobakteereita tutkittavalla aineella ja sillä on suuri diagnostinen arvo. Tämä on erityisen tärkeää tutkittaessa äskettäin diagnosoituneita tai hoidettuja potilaita, jotka erittävät pienen määrän mykobakteereja.

Verrattuna mikroskopiaan viljelmäkasvatus voi lisätä yksilöityjen tuberkuloosipotilaiden määrää yli 15-25 prosentilla ja myös todistaa tuberkuloosin aikaisemmissa vaiheissa, jolloin tauti on edelleen hyvin hoidettavissa. Kulttuuritutkimuksen erittäin tärkeä etu on mahdollisuus saada taudinaiheuttajan kulttuuri, joka voidaan tunnistaa ja tutkia huumeiden herkkyyden, virulenssin ja muiden biologisten ominaisuuksien suhteen.

Viljelymenetelmien haitat ovat niiden kesto (materiaalien odotusaika on 10 viikkoa). korkeammat kustannukset, diagnostisen materiaalin monimutkaisuuden käsittely.

Diagnostiikkamateriaalin käsittelyn periaatteet

Tavanomaisia ​​mikrobiologisia menetelmiä ei voida käyttää tuberkuloosin tutkimukseen. Tämä johtuu siitä. että mycobacterium tuberculosis kasvaa hyvin hitaasti ja useimmat kliinisen aineiston näytteet sisältävät nopeasti kasvavia pyogeenisiä ja putrefaktiivisia mikro-organismeja, sieniä. Niiden nopea kasvu rikkailla ravintoalustalla estää mykobakteerien kehittymistä ja ei salli tuberkuloosin aiheuttavan aineen eristämistä, joten ennen kylvöä diagnostista materiaalia on esikäsitettävä. Lisäksi potilaan hengitysteistä vapautuvia mykobakteereita ympäröivät yleensä suuri määrä limaa, mikä vaikeuttaa keskittymis- ta. Tässä yhteydessä ennen nokkimisen ja muiden vastaavien materiaalien kylvämistä tarvitaan nesteyttämistä ja dekontaminaatiota.

Kaikilla pesuaineilla ja dekontaminoivilla aineilla on enemmän tai vähemmän voimakas mykobakteereihin kohdistuva myrkyllinen vaikutus. Hoidon seurauksena jopa 90% mykobakteereista voi kuolla. Riittävän osan mykobakteeripopulaation säilyttämiseksi on välttämätöntä käyttää hellävaraisia ​​prosessointimenetelmiä, jotka mahdollistavat toisaalta tukahduttamalla nopeasti kasvavia pyogeenisiä ja putrefaktiivisia mikro-organismeja ja toisaalta säilyttämään materiaalissa olevien mykobakteerien elinkyky.

Natriumhydroksidiliuos 4%, liuokset, joissa on 3-substituoitua natriumfosfaattia 10%, bentsalkoniumkloridi-trinatriumfosfaatti, NALC-NaOH (N-asetyyli-L-kysteiini-NaOH) natriumhydroksidi) lopullisen NaOH-pitoisuuden ollessa 1%, virtsasta ja muista nestemäisistä aineista - rikkihapon 3% liuoksesta saastuneisiin näytteisiin, rasvapitoiset materiaalit - oksaalihapon liuos, joka on enintään 5%. Lisäksi joissakin tapauksissa käytä entsyymejä, pinta-aktiivisia aineita (detergenttejä). Tweenin ja joidenkin muiden pesuaineiden käyttö aiheuttaa vähemmän mykobakteerisolujen kuolemaa (40-50% elossa). niitä voidaan kuitenkin käyttää vain nestemäisiin materiaaleihin. Yleisimpiä maailmassa sai NALC-NaOH: ta. julkaistiin sarjoissa. Tällä menetelmällä voidaan eristää yli 85% mykobakteerisolupopulaatiosta. Kudosta sisältävien kiinteiden materiaalien puhdistaminen on vaikeampaa, koska on vaikea arvata materiaalin dispersion astetta homogenointiprosessissa. Esimerkiksi imusolmukkeiden biopsia-näytteiden käsittelyyn liittyy usein lisääntynyt saastumisnopeus ulkomaisen kasviston kanssa. Tällöin voidaan käyttää 1% etonia.

Epäyhogeeni- nen materiaali homogenoidaan käyttäen lasihelmiä dekontaminoivien aineiden läsnäollessa. Nestemäiset materiaalit esisentrifugoidaan ja käsitellään vain sedimenttiä.

Kylvö- ja inkubointitekniikat

Esikäsittelyn jälkeen materiaali sentrifugoidaan, minkä vuoksi mykobakteerit saostuvat ja niiden pitoisuus sedimentissä lisääntyy ("sedimentin rikastaminen"). Saatu sakka neutraloidaan ja siemataan sen kanssa (ympätään) tiheä ravintoaineen tai koeputkien pinta nestemäisellä (semi-liquid) väliaineella. Jäljelle jääneestä sedimentistä valmistetaan smears mikroskooppiseen tutkimiseen. Siemennustekniikan tulisi estää diagnoosimateriaalin ristikontaminaatio.

Mikrobiologisten tutkimustulosten luotettava kliininen tulkinta edellyttää, että noudatetaan seuraavaa sääntöä: mikroskooppiset ja kulttuuriset tutkimukset on suoritettava rinnakkain samasta diagnoosimateriaalinäytteestä.

Siirrostetut putket sijoitetaan termostaattiin 37 ° C: ssa 2 päivän ajan vaakasuorassa asennossa. Tämä antaa materiaalin tasaisemman imeytymisen ravintoalustalle. Kahden päivän kuluttua putket asetetaan pystysuoraan asentoon ja suljetaan ilmatiiviisti kumi- tai silikonipulloilla estääkseen siemenliemeen kuivumisen.

Termostaatissa pidetyt kasvit 37 o C: ssa 10-12 viikon ajan säännöllisellä viikoittaisella katselulla. Jokaisen testinäkymän avulla tallennetaan seuraavat parametrit:

  • kasvun kylvöpäivämäärästä visuaalisesti havaittu;
  • kasvuvauhti (CFU: n määrä);
  • istutuksen saastuminen ulkomaisen mikrobikasvuston tai sienten kanssa (tällaiset putket poistetaan);
  • ei ole näkyvää kasvua. Putket jäävät termostaattiin seuraavaan katseluun asti.

Ravinnetiedotusvälineet

Mykobakteerien viljelyä erilaisten ravintoaineiden avulla; tiheä, osittain nestemäinen, nestemäinen. Mikään tunnetuista ravinneaineista ei kuitenkaan ole ominaisuuksia, jotka varmistavat kaikkien mykobakteeristen solujen kasvun. Tässä suhteessa suorituskyvyn parantamiseksi on suositeltavaa käyttää samanaikaisesti 2-3 erilaista koostumusta sisältävää ravintoalustaa.

Tuberkuloosin aiheuttavan aineen ja sen huumeiden herkkyyteen liittyvän ensisijaisen eristyksen vakioelatusaineena WHO suosittelee Lowenstein-Jensen-alustaa. Tämä on tiheä muna-alusta, jolla mykobakteerien kasvu saadaan 20-25 päivänä sen jälkeen, kun bakterioskooppisesti positiivinen materiaali on kylvetty. Bakterioskooppisesti negatiivisen materiaalin kasvit vaativat pidemmän inkubointikauden (enintään 10-12 viikkoa).

Maassamme ehdotettu jakelu E.R. Finn Egg Medium Finn II. Se eroaa siinä, että L-asparagiinin sijasta se käyttää mononatriumglutamaattia, joka aiheuttaa muita tapoja mykobakteerien aminohappojen synteesiä. Kasvu esiintyy tällä välineellä hieman aiemmin, ja mykobakteerien erityksen esiintymistiheys on 6-8% korkeampi kuin Levenshtein - Jensen - väliaine.

Extrapulmonaalisen tuberkuloosin bakteriologisen diagnoosin tehokkuuden parantamiseksi on suositeltavaa sisällyttää Finn-II-muunneltuja väliaineita ravintoaineiden kompleksiin. Kasvun vauhdittamiseksi natriumtioglykolaattia (0,05%) lisätään ravintoalustaan ​​Finn-II, mikä vähentää happipitoisuutta. Mykobakteeristen entsyymijärjestelmien suojaamiseksi myrkyllisiltä lipidiperoksidaatiotuotteilta a-tokoferoliasetaatti-antioksidantti tuodaan ravintoalustaan ​​Finn-II pitoisuuteen 0,001 ug / ml. Vakiomenetelmän avulla tuotetun diagnostisen materiaalin kylväminen.

Venäjän TB-laboratorioissa käytetään myös muita kiinteän ravintoaineen muutoksia; ehdottama G.G. Mordovian ravintoalusta "New", jonka on kehittänyt V.A. Anikin ravintoalusta A-6 ja A-9 jne.

Koska kemoterapian aikana mikrobisten solujen erilaiset aineenvaihduntasarjat ovat vaurioituneet, osa mykobakteeripopulaatiosta menettää kykynsä kehittyä normaalisti tavallisilla ravintoalustalla ja vaatii osmoottisesti tasapainotettua (semi-liquid tai liquid) ravintoainetta.

Arviointi ja kirjaaminen kylvötavasta aineistosta

Jotkut mykobakteerikannat ja -mallit kasvavat hitaasti, kasvu voi näkyä jopa 90. päivän ajan. Tällaisten viljelykasvien määrä on pieni, mutta se kestää niiden viljelyä termostaatissa 2,5-3 kuukautta.

Mycobacterium tuberculosis virulentti-viljelmät kasvavat tavallisesti tiheässä munimediassa R-muotoisten erikokoisten ja lajien pesäkkeiden muodossa. Pesäkkeet ovat kuivia, ryppyisiä, norsunluutaisia, hieman pigmentoituneita. Muissa ympäristöissä Mycobacterium tuberculosis -kasvillisuudet voivat olla kosteampia. Kemoterapian kulkua tai hoidon aikana voidaan vapauttaa sileät, märkäkasvun omaavat pesäkkeet (S-muodot).

Kasveja eristettäessä käytetään erityisiä tutkimuksia, joilla erotetaan mycobacterium tuberculosis ei-tuberkuloosista mykobakteereista ja haponkestävistä saprofyteistä.

Positiivinen vastaus annetaan sen jälkeen, kun Zil-Nelsenillä on värjätty mikroskooppinen koe kasvatetuista pesäkkeistä. Kun kyseessä on mykobakteerien kasvaminen hiutaleissa, havaitaan kirkkaita punaisia ​​sauvoja, jotka valehtelevat yksittäin tai ryh- mättä muodostaen klusterit huovan tai punosten muodossa. Nuorissa kulttuureissa, erityisesti ne, jotka on eristetty pitkäaikaista kemoterapiaa saaneilla potilailla, mykobakteereille on tunnusomaista voimakas polymorfismi, jopa lyhyiden, melkein coccoid- tai pitkänomaisten muunnosten, kuten sieni-myseelin, läsnäolon ohella sauvan muotoisten muotojen mukana.

Mykobakteerien kasvunopeus on osoitettu seuraavalla kaaviolla: (+) - 1 - 20 CFU koeputkessa (vähäinen bakteeriperäinen erittyminen); (++) - 20-100 CFU in vitro (kohtuullinen bakteeriperäinen erittyminen); (+++) -> 100 CFU in vitro (runsas bakteerin erittyminen). Tuberkuloosin laboratoriodiagnostiikassa ei riitä antaa vastausta, onko mykobakteeri havaittavissa tällä tai sillä menetelmällä. on yksityiskohtainen käsitys mykobakteeripopulaation tilasta ja luonteesta, sen koostumuksesta ja ominaisuuksista. Nämä tiedot mahdollistavat prosessin tilan oikean tulkinnan, suunnitella taktiikoita ja korjata sen nopeasti.

Mykobakteerien kasvun kiihdyttämiseksi viime vuosina on ehdotettu ravinneaineita agar-emäksellä erilaisilla lisäravinteilla ja erityisellä kaasuseoksella. Mykobakteerien kasvun saavuttaminen näissä ympäristöissä viljelyn aikana luo ilmakehän, jossa on suuri hiilidioksidipitoisuus (4-7%). Tätä tarkoitusta varten käytä erityistä WITH2-yrityshautomot. Kuitenkin kehittyneimmät automatisoidut mykobakteerien viljelyjärjestelmät: MGIT-BACTEC-960 ja MB / Bact.

Yksi tällaisista järjestelmistä on MGIT-järjestelmä (mykobakteerien kasvun ilmaisuputki), joka kuuluu korkean teknologian kehittämiseen ja jonka tarkoituksena on nopeuttaa tuberkuloosin bakteriologista diagnoosia ja määrittää mykobakteerien herkkyys ensilinjan lääkkeille ja eräille toissijaisille lääkkeille. MGIT keskittyy käyttämään sitä osana VASTES-960-laitetta. Mikro-organismeja viljellään erityisissä putkissa, joissa on nestemäistä ravintoalustaa, modifioidun Mediumbrook-7H9: n perusteella. Mykobakteerien kasvun stimuloimiseksi ja ulkomaisen mikrokasvun kasvun estämiseksi käytetään MGIT Growth Supplement -kasvovalmisteita ja antibakteeristen lääkkeiden PANTA seosta.

Mikro-organismien kasvun rekisteröinti suoritetaan optisesti. Se perustuu fluoresenssiin, joka johtuu mykobakteerien hapen kulutuksesta kasvun prosesseissa. Erityisen koeputken pohjalla on happea riippuva fluori- kromiväre, ja se päällystetään silikonikerroksella. Mykobakteerien lisääntyminen johtaa putken putken hapen määrän pienenemiseen ja sen pitoisuuden pienenemiseen, mikä lisää fluoresenssia, mikä tulee näkyviin, kun putkea säteilytetään ultraviolettivalolla ja tunnistetaan automaattisesti VASTES-960-laitteeseen upotetuilla valoantureilla. Kasvun yksiköissä kirjattu hehkulamäärä (GU-kasvuyksiköt). Kasvutieto syötetään tietokoneeseen, jossa se voidaan tallentaa automaattisesti. Kasvukäyrien tietokoneanalyysi voi tarjota tietoa erilaisten mykobakteerien, myös ei-tuberkuloosien, esiintymisestä, ja auttaa myös arvioimaan mykobakteerien kasvuominaisuuksia.

Näiden järjestelmien käyttöönoton myötä mykobakteerien kasvua esiintyi merkittävästi, keskimäärin 11 päivää WASTES-960: llä ja 19 päivällä MB / Bactilla verrattuna 33 vuorokauteen tavallisella tiheällä ravintoalustalla. On huomattava, että nämä järjestelmät edellyttävät erittäin pätevää henkilöstöä. Nestemäisten väliaineiden kylvämateriaalia on seurattava kylvämällä Levenshteyn-Jensen -alustalla, joka on valmiustilassa tapauksissa, joissa tuberkuloosi ei aiheuta kasvua muilla välineillä.

Mykobakteerien lääkeherkkyyden määrittäminen

Minobakteerien spektrin ja herkkyyden määrittäminen tuberkuloosin torjunta-aineille on kliinisesti tärkeää, samoin kuin huumeidenkestävän tuberkuloosin leviämisen epidemiologinen arviointi. Lisäksi huumeidenkestävyyden seuranta mahdollistaa tuberkuloosin torjuntaa koskevan ohjelman tehokkuuden arvioinnin kokonaisuutena, koska se on integroitu indikaattori tuberkuloosin torjunnan kaikkien komponenttien toiminnasta.

Lääkkeen herkkyyden moninaisuus ja ajoitus:

  • ennen hoidon aloittamista kerran hoidon strategian ja taktiikan määrittämiseksi:
  • kun eristetään eri materiaaleista (ysköstä, BAL: stä, virtsasta, eksudateista, aivo-selkäydinnesteestä jne.) eristetyistä potilasviljelmistä, kaikki eristetyt kennot tutkitaan:
  • hoidon intensiivisen vaiheen päätyttyä kliinisen ja radiologisen dynamiikan puuttuessa:
  • tarvittaessa muuttaa hoito-ohjelmaa seuraavissa tapauksissa:
    • ei-itku-negatiivisuus;
    • uudelleenkulttuaminen kuteen jälkeen negatiiviseksi;
    • KUM: n määrä kasvoi jyrkästi alkuvähennyksen jälkeen. Tiedetään hyvin, että Mycobacterium tuberculosis -kannat, jotka ovat heterogeenisiä lääkeherkkyyden kannalta, eristetään tuberkuloosin potilaasta. Kantojen herkkyys tuberkuloosilääkkeille voi vaihdella lääkeaineiden alueella, resistenssin aste, taajuus ja nopeus.

Mycobacterium tuberculosis -bakteerin resistenssin aste määritetään vakiintuneiden kriteerien mukaisesti, jotka kohdistuvat resistenssin kliiniseen merkitykseen ja riippuvat lääkkeen anti-tuberkuloosiaktiivisuudesta, sen farmakokinetiikasta ja pitoisuudesta leesioon. maksimi terapeuttinen annos ja niin edelleen.

Mykobakteerien lääkeherkkyyden määrittäminen tehdään tällä hetkellä mikrobiologisilla menetelmillä:

  • absoluuttiset pitoisuudet (laimennusmenetelmä kiinteällä tai nestemäisellä ravintoalustalla),
  • mittasuhteet,
  • vastuskerroin.

Resistenssi ilmenee yleensä Mycobacterium tuberculosis -kasvien pesäkkeiden visuaalisesti havaitun kasvun muodossa, mutta on olemassa tekniikoita, jotka aiheuttavat kasvua Mycobacterium-solujen jakautumisen alkuvaiheissa värivirheiden muodossa. Nämä menetelmät vähentävät testin aikaa 3-4 päivästä 2 viikkoon.

WHO: n kemoterapiakomitean suosittelemien absoluuttisten pitoisuuksien menetelmä, joka on metodologisesti yksinkertaisin, mutta vaatii laboratoriomenetelmien korkeaa standardointia ja tarkkuutta, on yleistynyt Venäjällä. Lääkeherkkyyden testi koostuu joukosta putkia, joissa on ravintoalusta, joka on modifioitu tuberkuloosilääkkeillä. Pakkaus koostuu 2-3 putkesta, joilla on erilainen pitoisuus kussakin käytetystä lääkkeestä, yksi kontrolliputki, jossa on keskipitkä lääkeaine ja yksi putki, joka sisältää 1000 μg / ml natriumsalisylaattia tai 500 μg / ml para-nitrobentsoehappoa ei-tuberkuloottisten mykobakteerien kasvun havaitsemiseksi.

Sellaisten väliaineiden valmistamiseksi, joissa on käytetty Lowenstein-Jensen-modifioitua väliainetta (ilman tärkkelystä), joka on kaadettu pulloihin. Jokaiseen pulloon lisätään tietty määrä sopivaa laimennusta anti-TB-lääkkeestä. Pulloiden sisältö sekoitetaan perusteellisesti, kaadetaan koeputkiin ja valssataan kaltevassa asennossa 40 minuutin ajan 85 ° C: n lämpötilassa. On suositeltavaa koaguloida väliaine sähköisellä ruuvitaltalla automaattisella lämpötilan säätöllä. Keskipitkällä tuberkuloosilääkkeillä

1. krs voidaan säilyttää jääkaapissa 2-4 ° C: ssa 1 kuukauden ajan, toisen rivin lääkkeillä - enintään 2 viikkoa. Säilytysvälineitä huumeiden kanssa huoneenlämmössä ei voida hyväksyä. Tuberkuloosilääkkeiden liuoksia valmistettaessa otetaan huomioon niiden aktiivisuus laskemalla pitoisuus, joka on säädetty lääkkeen epäspesifisen osan, puhtauden jne. Molekyylipainon suhteen. Lääkeherkkyyden määrittäminen vain kemiallisesti puhtailla aineilla.

Menetelmän periaate on tuberkuloosin torjunta-aineen pitoisuuden määrittäminen, joka estää merkittävän osan mykobakteeripopulaation kasvua. Oikein suoritettuna tämä menetelmä on hyvä tarkkuus.

Ennen testausta on varmistettava, että Mycobacterium tuberculosis -valikoituneella viljelmällä ei ole vierasta mikrofloraa. Mykobakteerien viljelmästä natriumkloridin 0,9-prosenttisessa liuoksessa valmistetaan homogeeninen suspensio, joka sisältää 500 miljoonaa mikrobisolut 1 ml: ssa (optinen sameusstandardi, 5 yksikköä). Tuloksena oleva suspensio laimennetaan 0,9-prosenttisella natriumkloridiliuoksella (1:10) ja 0,2 ml suspensiota lisätään kullekin putkelle joukolle viljelyalustaa. Istutetut putket sijoitetaan termostaattiin 37 ° C: ssa ja pidetään vaakasuorassa asennossa 2-3 päivän ajan siten, että ravintoalustan viistetty pinta on inokuloitu tasaisesti mykobakteerin tuberkuloosin suspensiolla. Sitten putket siirretään pystyasentoon ja inkuboidaan 3-4 viikkoa. Tulosten mittaus suoritetaan 3-4 viikkoa.

Koska taudinaiheuttajan eristämisen ajoitus kliinisestä aineesta ravintoalustalla on vähintään 1-1,5 kuukautta, tämän menetelmän avulla voidaan määrittää lääkeherkkyyden määrittämisen tulokset aikaisintaan 2-2,5 kuukauden kuluttua materiaalin kylvämisestä. Tämä on yksi menetelmän pääasiallisista haitoista.

Tulkita tulokset mykobakteerien lääkeherkkyyden määrittämiseksi tiettyjen kriteerien perusteella. Tiheässä elimistössä kulttuuria pidetään herkäksi lääkkeen pitoisuuteen, joka on sisällytetty elatusaineeseen, jos tämän putken myrkyllisten mykobakteerien pesäkkeiden määrä lääkeaineella ei ylitä 20: tä, ja runsaasti kasvua kontrolliputkessa ilman lääkkeitä. Vain yli 20 pesäkkeen läsnä ollessa viljelmää pidetään tämän pitoisuuden vastustuskyvänä. Käytännössä, kun saatiin kasvun tulokset koeputkissa, lähellä 20 CFU: ta. on välttämätöntä ilmoittaa kliiniselle yksikölle, että herkkyys tai stabiilisuus tässä tapauksessa on rajatylittävä, koska joskus tämä voi selittää kliinisten indikaattorien sumean dynamiikan.

Useiden lääkkeiden kohdalla on todettu tietty pitoisuus, jossa kriittisen mykobakteeripopulaation lisääntymistä havaitaan. Näitä pitoisuuksia kutsutaan "kriittiseksi". Stabiilisuuden kriteerinä käytetään mykobakteeripopulaation kasvun suuruutta ravintoalustalla lääkkeen kanssa kriittisessä pitoisuudessa.

Kotona tapahtuva fysiologinen käytäntö lääkeaineiden resistenssin määrittämisessä ei rajoitu vain kriittisten pitoisuuksien määrittämiseen. Tämä johtuu siitä. että taudinaiheuttajan lääkeaineiden vastustuskyvyn laajennettu määrittäminen antaa kliinikon paremmin muodostaa kemoterapia-taktiikan käyttämällä tietoa lääkekombinaatioiden potentiaalisesta vaikutuksesta, ennakoimaan ristiresistenssiä tai käyttämään tehokkaampia lääkkeitä käytetyistä tuberkuloosilääkkeistä.

Absoluuttisten pitoisuuksien menetelmä on kuitenkin yksinkertaisin ja kaikkein herkin virheiden toteuttamisessa. Luotettavuus erityisesti määritettäessä herkkyyttä toissijaisille lääkkeille ja suhteiden menetelmä on yleinen Venäjän ulkopuolella. Se ottaa huomioon absoluuttisen pitoisuusmenetelmän puutteet, mutta se vie enemmän aikaa.

Menetelmä on hyvin samanlainen kuin absoluuttinen pitoisuusmenetelmä. Koeputkien valmistaminen samoilla tavoilla valmistetuilla lääkkeillä. kuten absoluuttisessa pitoisuusmenetelmässä. Mycobacterium tuberculosis -suspension kylvöannos pienenee kuitenkin 10 kertaa. joka tasoittaa tiettyjen Mycobacterium tuberculosis -kantojen spontaanin resistenssin esiintymistiheyttä lääkkeisiin, kuten ethambutoliin, protionamidiin, capreomysiiniin. Kontrollina käytä 2 tai 3 putkea, joiden siemennosannos on sama kuin koeputket, laimennettuna peräkkäin 10 ja 100 kertaa. Resistenssin kriteeri on Mycobacterium tuberculosisin visuaalisesti havaitun kasvun osuus. Ensimmäisen rivin lääkkeissä kestävyyskriteeri on kasvun ylimäräisyys, joka on 1% alkuperäisestä väestöstä, toisen rivin lääkkeissä - kasvua on 1 tai enemmän kuin 10% alkuperäisestä, riippuen valitusta kriittisestä pitoisuudesta.

WHO: n ja kansainvälisen tuberkuloosiyhdistysryhmän työryhmä tuberkuloosin torjuntaan liittyvän vastustuskyvyn havaitsemiseksi tehtiin vuonna 1997 näiden vaatimusten mukaiseksi, mikä viittaa siihen, että Levenshteyn-Jensenin tiheään munaviljelyyn kasvavia mykobakteereja pidetään vakaina

  • dihydrostreptomysiini - 4 ug / ml;
  • isoniazid - 0,2 ug / ml:
  • rifampisiinia - 40 μg / ml:
  • Ethambutol - 2 μg / ml.

Vuonna 2001 ehdotettiin kriittisiä pitoisuuksia seuraaville toissijaisille lääkkeille (kriittiselle 1 prosentin osuudelle):

  • capreomysiini - 40 ug / ml;
  • protionamidi - 40 ug / ml;
  • kanamysiini - 30 ug / ml;
  • viomysiini - 30 ug / ml;
  • cycloseriini - 40 ug / ml;
  • aminosalisyylihappo - 0,5 ug / ml;
  • Ofloksasiini - 2 ug / ml.

Kasvutulokset arvioidaan 4 viikon kuluttua alustavanaan ja 6 viikon viljelyn jälkeen lopullisina.

Lääkeherkkyyden määrittämiseksi pyratsinamidille, jota käytetään laajasti tuberkuloosin nykyaikaisessa kemoterapiassa, suositeltu kriittinen pitoisuus on 200 μg / ml. Kuitenkaan ei ole vielä yleisesti hyväksyttyä menetelmää huumeidenkestävyyden määrittämiseksi tätä lääkettä varten kiinteään ravintoaineeseen, koska sen antibakteerinen aktiivisuus ilmenee vain happamassa väliaineessa (pH o C;

  • pigmenttien muodostumisen puute (norsunluuväri);
  • voimakas haponkestävä väri;
  • positiivinen niasiini taikina;
  • positiivinen nitraattireduktaasi -testi;
  • termostabilisen katalaasin puuttuminen (68 o C).
  • Levenshteyn-Jensenin ympäristön kasvun puute, joka sisältää:
    • 1000 ug / ml natriumsalisylaattia,
    • 500 ug / ml paranitrobentsoehappoa,
    • 5% natriumkloridia:
  • kasvua läsnä ollessa 1-5 ug / ml tiofeeni-2-karboksyylihappoa.
  • Eriytettyjen mykobakteerien erilaistumisen merkitys kasvaa merkittävästi tuberkuloosiin tai mykobakteerioon liittyvien HIV / aids-tapausten rekisteröinnin tiheyden kasvaessa. Tällä hetkellä ei ole ehdotonta varmuutta siitä, että käytännön alueelliset laboratoriot ovat valmiita suorittamaan tämän työn määrä oikein.

    Tuberkuloosin immunologinen diagnoosi

    On useita yleisiä ilmiöitä, lääkkeitä ja immunologisia testejä, jotka alun perin havaittiin tuberkuloosin aikana tai mykobakteerien immuunivasteen mallissa. Näitä ovat BCG ja tuberkuliini, ilmiö, kuten iho HRT (tuberkuliinitutkimukset - Pirke- ja Mantoux-reaktiot), reaktion tuberkuliinin antamiseen herkistettyjen eläinten ihon alle (Koch-ilmiö). Eräitä ensimmäisiä vasta-aineita tartuntataudeissa havaittiin myös tuberkuloosissa. Tietenkin, mitä syvemmälle ymmärretään tuberkuloosin vastaisen immuniteetin mekanismeista ja niiden geneettisestä kontrollista, laajempi voi olla immunologisten menetelmien ja lääkkeiden käyttö, jotka vaikuttavat immuunijärjestelmään käytännön ongelmien ratkaisemiseksi.

    Tärkein ja vaikea käytännön ongelma pidetään tällä hetkellä tuberkuloosin havaitsemiseksi väestön massasuunnitteluprosessissa. Huolimatta lukuisista "onnistumisista" (rajoitetuista materiaaleista) raportoinnista huolimatta ei ole olemassa sopivaa immunologista menetelmää (joka on lisätty "mihinkään käsiin") ja valmistetta näihin tarkoituksiin.

    Immunologisia menetelmiä, erityisesti serologisia tutkimuksia (antigeenien, vasta-aineiden määrittäminen) ja tuberkuliini-provokatiivisia testejä käytetään laajasti kliinisessä käytännössä.

    Erotusdiagnoosissa käytettyjen immunologisten tutkimusten joukossa ovat serologiset menetelmät - antigeenien ja vasta-aineiden määritelmä eri elimistössä.

    Mycobacterium tuberculosis -vasta-aineiden määrittämisen spesifisyys riippuu immuuni-analyysissä käytetyistä antigeeneistä. Merkittävää määrää antigeeneja on ehdotettu, joista ensimmäinen on tuberkuliini PPD:

    • PPD ja muut monimutkaiset valmisteet viljelynesteestä;
    • ultraääni hajotus;
    • Triton-uute ja muut soluseinien monimutkaiset valmisteet;
    • 5-antigeeni (Daniel);
    • 60-antigeeni (Coccito);
    • lipoarabinomannan;
    • joustintekijä (trehaloosi-6,6-di-mikolaatti);
    • fenoli- ja muut glykolipidit;
    • lipopolysakkaridi;
    • fibronektiinin sitova antigeeni;
    • proteiinit (useimmiten rekombinantti); 81,65,38,34,30,19,18,16,15,12 KDA ja muut.

    Venäläisten ja ulkomaisten tutkijoiden monien vuosien tutkimusten tuloksena todettiin vasta-ainetuotannon päämallit ja tuberkuloosin serologisen diagnoosin tehokkuus: monimutkaisempi antigeeni, sitä suurempi herkkyys ja testien spesifisyys. Spesifisyys eri maissa vaihtelee M. tuberculosis -lajin ja muiden kuin tuberkuloosien mykobakteerien populaation, BCG: n rokotuksen jne. Infektion mukaan. Lapsipotilaiden serotiagnosis-informatiivisuus on alempi kuin aikuisilla. Ensisijaisessa tuberkuloosissa (usein lapsilla) IgM: n määritelmä on informatiivisempi. toissijaisella IgG: llä. HIV-infektoidussa serodiagnostisessa informaatiossa vasta-aineiden määritys vähenee. Vasta-aineiden määrittämisen tehokkuus riippuu useista "kliinisistä hetkistä": prosessin aktiivisuus (mykobakteerien esiintyminen tai puuttuminen, ontelojen läsnäolo, infiltraation aste), prosessin laajuus ja sen kesto.

    Entsyymi-immunoanalyysin (ELISA) menetelmä on herkkyys noin 70%. Tutkimuksen puutteellisuus johtuu sen alhaisesta spesifisyydestä. Aikaisemmin tarkasteltiin mahdollisuutta käyttää serologista seulontaa suuririskisillä ryhmillä, erityisesti keuhkoissa tapahtuneiden tuberkuloosin jälkeisten ihmisten keskuudessa.

    ELISA-spesifisyyden lisäämiseksi jatketaan tarkempia antigeenejä, mukaan lukien geenitekniikan avulla saadut tulokset: ESAT-6 ja muut (ks. Edellä). Tiukasti spesifisten antigeenien (38 kDa, ESAT) käyttö lisää spesifisyyttä. mutta vähentää merkittävästi analyysin herkkyyttä. Yhdessä IFA (kokeellinen laboratoriokoe järjestelmiä. Esim Pathozyme ELISA-kittiä) on myös sarjat sivusuunnassa immunokromatografisen suodattamalla (Mycodot), samoin kuin muita samankaltaisia ​​testejä (piste-analyysi kalvon) visuaalisen arvioinnin tulos. Näitä testejä suorittaessaan analyysi tapahtuu 10-30 minuutissa; he eivät vaadi erityisiä laitteita, vaativat tulosten visuaalista arviointia, joka liittyy tunnetulle subjektiivisuudelle. Näillä menetelmillä on suunnilleen samat herkkyys- ja spesifisyysominaisuudet (70% ja 90-93% vastaavasti) kuin perinteinen ELISA.

    Immunologisen analyysimenetelmien käytöllä on tietty arvo lisäkysymyksenä, joka otetaan huomioon käytettyjen menetelmien kompleksissa tuberkuloosin erilai- sen diagnoosin aikana, erityisesti sen ylimääräisten muotojen diagnosoinnissa. ELISA on tehokkain diagnosoimalla tuberkuloottista aivokalvontulehdusta aivoverenkierron nesteen tutkimuksessa. Tässä tapauksessa analyysin herkkyys on 80-85% ja spesifisyys 97-98%. On todisteita mykobakteerin tuberkuloosin vasta-aineiden määrittämisestä kyynelnesteessä tuberkuloottisen uveiitin diagnosoinnissa.

    Gamma-interferonin synteesin indusointi in vitro

    Gamma-interferoni (IFN-y) on spesifisen immuunipuolustuksen tekijä, joka toteutetaan makrofagien entsyymijärjestelmien aktivoimalla. IFN-y: n synteesin indusoiminen herkistetyillä T-lymfosyytteillä aiheuttaa niiden vuorovaikutuksen mykobakteeristen antigeenien kanssa.

    Koska antigeenejä käytetään tuberkuliini-PPD: nä. ja geenitekniikan avulla saadut spesifiset antigeenit, erityisesti antigeenit ESAT-6 (varhaistuotettu antigeeni, jonka molekyylimassa on 6 kDa) ja CFP-10 (proteiiniviljelmäsuodos, 10 kDa). Geneettinen tekniikka tai rekombinanttiantigeenit puuttuvat BCG-rokotteen soluista ja muista mykobakteereista. Tuberkuliinihoitoa käytettäessä IFN-y-induktiokokeen tulokset ovat verrattavissa tuberkuliinin ihokokeiden tuloksiin (suora korrelaatio). Kun käytetään geneettisesti muokattuja antigeenejä, testitulokset ovat tarkempia eivätkä ne ole riippuvaisia ​​aiemmasta BCG-rokotuksesta. Tutkittaessa rokotettuja yksilöitä, joilla ei ole ollut yhteyttä tuberkuloosi-infektioon, testin spesifisyys on 99%. Testin herkkyys tuberkuloosia sairastavilla potilailla on 81-89%.

    Testejä ja diagnostisia työkaluja on kehitetty perustuen lyhyen aikavälin solujen viljelyyn tai koko veren mononukleaarisia soluja eristettiin verestä antigeenien kanssa Mycobacterium tuberculosis in vitro ja sitä seuraava määritys IFN-γ-pitoisuus tai laskemalla T-lymfosyyttien, jotka syntetisoivat IFN-γ. In vitro syntetisoituneen interferonin konsentraatio määritettiin ELISA: lla käyttäen monoklonaalisia vasta-aineita, jotka sitovat IFN-y: ää. Tämän jälkeen kalibrointistandardin IFN-y avulla määritetään sen pitoisuus tablettin koeputkessa tai kaivoissa.

    Kun suoritetaan Elispot-testi, IFN-y: n syntetisoivien T-lymfosyyttien määrä. lasketaan Cupin pinnalle, joka peitetään vasta-aineilla IFN-y: lle.

    diagnoosin kehittäjät, jotka perustuivat IFN-y: n induktioon in vitro, jonka US Drug and Product Agency hyväksyi, väittävät, että testin käyttäminen on mahdotonta erottaa piilevä tuberkuloosi-infektio aktiivisesta tuberkuloosista. Siksi alueilla, joilla on suuri infektion taso, testillä ei ole suoraa diagnostista arvoa. Maassamme sitä voidaan kuitenkin käyttää erottamaan tuberkuloosipitoisuudet lapsilla rokotuksen jälkeisistä allergioista sekä arvioimaan erityisominaisuuden tasoa hoitoprosessissa.

    Tällä hetkellä tutkitaan kotimainen testijärjestelmä IFN-y-synteesin induktiomäärityksen määrittämiseksi spesifisillä tuberkuloosi-antigeeneillä in vitro.

    Immuunijärjestelmä ja tuberkuloosin kulku, immunokorjaus

    Tuberkuloosin hoitamisessa ihmisillä on muutoksia antigemeeassa ja immuunijärjestelmän tilassa.

    Tietoja eritteistä ja kudoksista on suurelta osin ristiriitaisia. Ainoa asia, joka voidaan havaita hyvällä syyllä, on se, että huomattava määrä aktivoituja T-lymfosyyttejä esiintyy tavallisesti tuberkuliinisissa granulomoissa.

    On järkevää viitata kahteen muuhun kohtaan, jotka ovat välttämättömiä ymmärtää immunologisten mekanismien merkitystä tuberkuloosin hoidossa ihmisillä:

    • AIDS-potilailla on erityisen korkea esiintyminen moniresistentteinä;
    • monilääkeresistenssin tapauksessa (ja ilman HIV-infektiota), heikentynyt immuniteetti (ensisijaisesti T-solulinkki) on erityisen merkittävä.

    Tuberkuloosissa käytetään laajalti erilaisia ​​immunokorjausmenetelmiä: ne ovat pääasiassa lääkkeitä, jotka vaikuttavat ensisijaisesti T-soluimmuuniteettiin ja mononukleaaristen fagosyyttien (kateenkorvahormonit, isofoni, liukasidokset, polyoksidoniini jne.) Järjestelmään. samoin kuin koko (heikennetyt) mykobakteerit ja niiden komponentit.

    Tuberkuloosin molekyylibiologinen diagnoosi

    Molekyylibiologian menetelmiä infektiotautien diagnosointiin ovat pääasiassa perustuvat menetelmät manipuloimalla kanssa genomisen aineen bakteeri- ja viruspatogeenien tunnistaa tietyn geneettisen materiaalin - DNA-segmenttejä, jolla on nukleotidisekvenssi, joka on spesifinen tietyn tyyppisen tai patogeenin kantoja analysoida erityisiä DNA-sekvenssit geeneissä, jotka määrittävät taudinaiheuttajan herkkyyden tiettyihin lääkeaineisiin, sekä analysoimaan tehtävän tiettyjen patogeenien geenien pellava-aktiivisuus. Molekyylisiä biologisia menetelmiä käytetään laajalti tieteellisessä tutkimuksessa ja käytännön sovelluksessa erilaisten bakteeri- ja virusinfektioiden diagnoosissa ja kontrolloinnissa sen jälkeen, kun Kerry Mulllis (Nobel-palkinnon saaja 1989) havaittiin polymeraasiketjureaktion vuonna 1985.

    Polymeraasiketjureaktion menetelmien periaatteet ja mahdollisuudet

    PCR: n avulla voit monistaa (moninkertaistaa) in vitro nukleotidisekvenssin (patogeenin DNA-fragmentti) useita tunteja miljoona kertaa. Reaktion suorittaminen DNA: n yksittäisten säikeiden läsnä ollessa määrittää analyysin äärimmäisen herkkyyden.

    DNA-ketjun tiettyjen osien nukleotidisekvenssi määrittää mikro-organismin geneettisen identiteetin, joka selittää PCR: n korkean spesifisyyden.

    Tämän menetelmän arvo Mycobacterium tuberculosisin ominaisuuksien havaitsemiseksi ja tutkimiseksi johtuu mikro-organismin biologisista ominaisuuksista hyvin hitaalla kasvulla: Mycobacterium tuberculosis DNA: n kaksinkertaistamisaika viljelyn aikana on 12-24 h.

    PCR-menetelmän periaate on monistus - moninkertainen, miljoonia kertoja. spesifisen DNA-sekvenssin jaksojen monistuminen koeputkessa olevan mikrovolumeissa, jossa seuraavaa reaktiota kolmesta vaiheesta syklisesti toistetaan, ja jokainen niistä tapahtuu eri lämpötilajärjestelyissä:

    • Vaihe I - kaksoisjuosteisen DNA: n denaturointi, kun sitä kuumennetaan sen ketjujen eroavuudella;
    • Vaihe II - komplementaarinen sitoutuminen (hybridisaatio) alukkeiden (primääristen oligonukleotidien) kanssa tarkasti spesifisten ketjujen päätyosat, jotka on valittu DNA-fragmentin monistamiseksi;
    • Vaihe III - DNA-fragmentin ketjun loppuun saattaminen käyttäen termostabiilia DNA-polymeraasia.

    In vitro -vahvistuksessa on oltava templaatti-DNA-molekyylit. neljä tyyppistä deoksinukleosiditrifosfaattia (nukleotidit), jotka sisältävät vastaavat typpipitoiset emäkset: adeniini (A), tymiini (T), guaniini (D), sytosiini (C); keinotekoisesti syntetisoituja siemen- oligonukleotideja (alukkeita), jotka koostuvat 18-20 emäsparista; termostabiili DNA-polymeraasi-entsyymi, jonka lämpötila optimoi 68-72 ° C ja magnesiumioni.

    PCR: n spesifisyys riippuu DNA-fragmentin valinnasta. Sen mukaisesti syntetisoidaan kyljen siemenet oligonukleotidit. DNA-ketjun hybridisaation ja DNA: n täydentymisen spesifisyys määritetään seuraavien typpipitoisten emäsparien komplementaarisuuden periaatteen mukaisesti: adeniini-tymiini, guaniini-sytosiini.

    Määrittää genomisen tuberkuloottinen mykobakteerien kompleksi tehokkain kohteen monistuminen useimmissa testijärjestelmissä valittu DNA-fragmentti IS6110, joka useimmissa Mycobacterium tuberculosis -genomin on merkittävä määrä (10-20) toistoja, joka tarjoaa yhdessä spesifisyys, korkea herkkyys määrityksessä. Samanaikaisesti on kuvattu Mycobacterium tuberculosis -kantoja, joilla on pieni määrä toistoja tai IS6110-fragmentin puuttumista.

    DNA-molekyylien eristäminen biologisesta näytteestä

    PCR: n suorittamiseksi patogeenin DNA-molekyylit on eristettävä biologisesta materiaalista vähimmäistilavuudessa, minimimääränä ei-kostuttavaa DNA: ta ja erilaisia ​​entsyymi-DNA-polymeraasin inhibiittoreita.

    Näytteenvalmistelu olisi suoritettava olosuhteissa, jotka estävät erittyvien DNA-molekyylien tutkittavien näytteiden ristikontaminaation. Tätä tarkoitusta varten on välttämätöntä esilata huone ultraviolettivalolla, pöydien ja laitteiden lattiat ja työpinnat - klooripitoiset liuokset. On myös käytettävä puhtaita käsineitä, kertakäyttöisiä putkia ja vipuja automaattisille pipeteille.

    Eristämiseksi DNA Mycobacterium tuberculosis kliinisistä näytteistä (aivo-selkäydinnesteestä, keuhkoputkien pesu), joka sisältää suuren määrän soluja, solujäänteitä, tai niiden suolat, riittävä sentrifugoida näytteen 3-4000. RPM, lisätä lietteen 20-30 ui 2%: ista triton X-100: ta ja lämmitä 90 ° C: ssa 30 minuutin ajan.

    Nokso-näytteiden valmistukseen tarvitaan tehokasta laimennusta, jota käytetään tyypillisesti 4% natriumhydroksidiliuosta ja N-asetyyli-L-kysteiiniä (NALC) 50-80 mg näytteestä riippuen näytteen viskositeetista riippuen. NALC-liuos on valmistettava ex tempore tai NALC-jauhe voidaan lisätä kuivassa muodossa suoraan näytteeseen. Laimennuksen jälkeen näytteet sentrifugoidaan 15 min 3,5 - 4 tuhannella kierroksella minuutissa (3000 g) 50 ml: n putkissa, joissa on kierrekorkit, ts. samoissa olosuhteissa, joita suositellaan ynnäen kylvövalmistukseen.

    Louhinta DNA-pelletti menetelmä on käytetty useimmiten perustuu käytön 5-6 molaarista guanidiini-isotiosyanaattia hajotusreagenssi kuten mikrohuokoiset hiukkaset ja piioksidista ( "piimaa") sorboiva DNA-molekyyli. Epäspesifinen aineet, kuten inhibiittorit mahdollista, sitten pestiin 2,5 molaarista guanidiini ja etanoliliuosta, minkä jälkeen DNA-molekyyli on desorboidaan vedessä, ja nämä näytteet käytetään suorittamaan PCR. DNA-uutoteknologian yksinkertaistamiseksi "piimaa" korvataan usein piidioksidilla päällystetyillä magneettisilla mikropartikkeleilla. Samanaikaisesti, sentrifugoimisen sijasta hiukkasten saamiseksi käytetään erityistä magneettista putkea mikrotestiputkille.

    Venäjällä on kehitetty alkuperäinen mykobakteerien immunomagneettisen erottamisen menetelmä, jota seuraa patogeenin DNA: n uuttaminen. Mycobacterium tuberculosis immunomagneettisella erotusmenetelmällä käyttäen ferroparticles koko on 3-5 mikronia, päällystää piidioksidilla, johon on kiinnitetty kemiallinen sidos on polyklonaalinen (kaniinin) vasta-aineita Mycobacterium tuberculosis. Emäksisen lyysi- sen jälkeen nokosinäytteet neutraloidaan Tris-HCl: n happamalla liuoksella ja inkuboidaan immunomagneettisen sorbentin kanssa. Sitten immunopolymeeriset hiukkaset kerätään käyttäen magneettista kärkeä, jossa on vaihdettava kärki, joka siirretään mikroviemäriin, joka saostetaan. 20-30 ui 2-prosenttista Triton X-100 -liuosta levitetään ja kuumennetaan 30 minuuttia 90 ° C: ssa. Supematanttia käytetään DNA-templaattina PCR-analyysiin.

    Vaikea ongelma on Mycobacterium tuberculosis DNA: n eristäminen biopsianäytteistä. Biopsin hajottamiseksi käytetään entsyymi-proteinaasia K lopullisessa konsentraatiossa 200 - 500 mg / l 56 ° C: n lämpötilassa yön aikana. Seuraavaksi jaa yksi tunnetuista menetelmistä. Biopsia-näytteiden PCR-analyysissä ylimääräinen epäspesifinen DNA usein pyrkii estämään reaktion, joka vaatii toistuvasti DNA-uutetta.

    Tulosten havaitsemismenetelmät

    Reaktion päättymisen jälkeen monistetut patogeenin DNA-fragmentit tunnistetaan käyttäen erilaisia ​​menetelmiä.

    Tunnettu menetelmä geelielektroforeesille. Samaan aikaan saatu DNA-fragmentti tunnistetaan positiivisella kontrollilla, joka sisältää halutun spesifisen DNA-fragmentin, tai fragmentin aiemmin tunnetulla koolla (nukleotidiparien lukumäärä), joka määritetään käyttämällä standardimolekyylimarkkeria.

    Spesifisen väriaineen läsnäollessa etidiumbromidi, joka on sisällytetty kaksoisjuosteiseen DNA: han. Syntetisoitu DNA-fragmentti havaitaan bändinä hehkuttaen ultraviolettisäteilyn vaikutuksesta.

    DNA-fragmentin koko, joka määritetään elektroforeesilla etäisyyden alusta, on vastattava tunnettua molekyylipainomerkkia tai positiivista kontrollia.

    Muut menetelmät määrittämiseksi PCR-tulokset perustuvat hybridisaation yhden ketjun PCR-tuotteet, joissa oligonukleotidin sille komplementaarinen - leimattua DNA-koetinta biotiinilla, minkä jälkeen havaitaan kautta entsymaattiset reaktiot, esimerkiksi sitomalla streptavidiini-biotiini alkalinen fosfataasi.

    Tämäntyyppisen havainnoinnin perusteella on luotu PCR-analysaattorit, joissa PCR-tulosten havaitseminen suoritetaan automaattisesti näytteen optisen tiheyden lukemisen tuloksena, kun entsymaattinen reaktio on tapahtunut.

    Näiden menetelmien haitat ovat intralaboratorion kontaminaation mahdollisuudet DNA-molekyylien melko lyhyiden fragmenttien kanssa. Nämä molekyylit, kun ne vapautetaan hiljattain tutkittuihin näytteisiin, tulevat PCR: n matriisille ja johtavat vääriä positiivisiin tuloksiin.

    Tältä osin väärän positiivisen tuloksen estämiseksi otetaan käyttöön tiukat säännöt tilojen erottamiseksi ja eristämiseksi: DNA: n eristämiseksi biologisista näytteistä; tiloja tulosten havaitsemiseksi (elektroforeesi) puhdasta vyöhykettä. Nämä huoneet ovat todennäköisen saastumisen alue. Toinen eristetty alue on puhdas tila DNA-näytteiden ottamiseksi testiputkiin reaktioseoksella PCR: lle. Lopuksi oletetaan, että päälaite - DNA-vahvistin - olisi siirrettävä erilliseen, mahdollisesti toimistoon, huoneeseen.

    Estää tuotteiden saastumisen edellisen reaktiot - noin Likon-amp PCR system testi sen sijaan dezoksinukleozidtimidina sisältävät dezoksinukleoziduridin joka, kun in vitro synteesi sisältyvän piirin sijasta oikeassa asennossa, ts typpipitoisen tymiinin, joka on läsnä natiivissa DNA: ssa, korvataan uracililla. Uracilin DNA-glykosylaasi, joka on lisätty reaktioseokseen analysoitavalle aineelle, tuhoaa vain kontaminoivat fragmentit deoksiuridiinilla, mutta ei natiivista analysoitua DNA: ta. joka sisälsi deoksitymidiiniä. Seuraava lämmitys 94 ° C: ssa inaktivoi tämän entsyymin eikä häiritse PCR-monistusta.

    RRNA: n isotermiseen monistukseen perustuva testijärjestelmä, jolle DNA-molekyylien käänteistranskriptio ja synteesi suoritetaan ensin. joka vuorostaan ​​on mallipohja RNA-molekyylien myöhemmälle synteesille. RNA: n amplloneja detektoidaan akridiinilla värjätyllä DNA-koettimella hybridisaation aikana reaktioputkiliuoksessa. Tämä menetelmä, jolla on suuri herkkyys, on etuna analyysin suorittamisessa yhdessä koeputkessa, mikä estää saastumisen. Tekijöiden mukaan tämän menetelmän herkkyys hengitysnäytteissä saavuttaa 90% spesifisyydellä 99-100%.

    Uusia havaintomenetelmiä toteutetaan reaaliaikaisessa PCR: ssä. Näitä menetelmiä erottaa ensisijaisesti se seikka, että PCR ja sen tulosten havaitseminen suoritetaan samanaikaisesti yhdessä suljetussa putkessa. Tämä ei ainoastaan ​​teknisesti yksinkertaista analyysimenetelmää vaan estää myös laboratoriotilojen ja testinäytteiden kontaminoitumista PCR: tä edeltävillä tuotteilla.

    Reaaliaikaisessa PCR: ssä tulosten havaitseminen johtuu fluoresenssista, joka syntyy fluorogeenisen DNA-koettimen hybridisaatiosta PCR: n aikana amplifioidun spesifisen DNA-fragmentin kanssa. Rakenne fluorogeeniset DNA-koettimet on rakennettu siten, että fluoresoiva markkeri vapautuu entsymaattisen reaktion tuloksena, tai etääntynyt sammuttaja molekyylin fluoresenssi ainoastaan ​​spesifisen hybridisaation, joilla on haluttu DNA-molekyyli monistetaan PCR: n aikana. Kun koettimen kanssa hybridisoitujen molekyylien määrä kasvaa, fluoresenssin lisääntyminen havaittavalle tasolle on verrannollinen monistetun tuotteen molekyylien lukumäärään. Koska DNA-fragmenttimolekyylien määrä kaksinkertaistetaan kunkin PCR-syklin aikana, syklin numero, josta fluoresenssi määritetään ja lisääntyy, on kääntäen verrannollinen alkuperäisen näytteen DNA-molekyylien lukumäärään. Jos reaktio on esitellä kalibroijana useita eri tunnettuja pitoisuuksia molekyylien vastaava DNA-fragmentti, Mycobacterium tuberculosis, käyttäen tietokoneohjelmaa voidaan laskea ja määrää genomisen DNA: testimateriaalin.

    Jokainen standardi näyte on päällekkäinen. Kvantitatiivinen kriteeri on PCR-syklien vähimmäismäärä, joka tarvitaan havaitun fluoresenssin aloittamiseen ja kasvuun. Abskissa on syklien lukumäärä; koordinaattiakseli on fluoresenssin arvo. DNA: n konsentraatio on kääntäen verrannollinen fluoresenssin ilmenemiseen tarvittavien syklien lukumäärään. Oikean pylvään (21-32) ikkunoissa on merkitty vastaavien pitoisuuksien syklinumerot. Eroja DNA-fragmenttien kymmenkertaisten pitoisuuksien välillä 10 2 -10 6 ml - 3,2-3,4 syklit. Kaksi potilasta IS6110-fragmenttien pitoisuus oli noin 10 3 / ml ja 10 4 / ml. Ottaen huomioon Mycobacterium tuberculosis -genomin genomissa olevien analysoitujen fragmenttien toistumien (6-20) lukumäärä kliinisissä yksilöissä mykobakteerien määrä on vastaavasti noin 100 ja 1000 solua.

    PCR: n käyttö tuberkuloosin diagnoosissa

    PCR-menetelmää käytetään eniten tuberkuloosin nopeutettuun diagnosointiin - mykobakteerin tuberkuloosin havaitsemiseen kliinisissä näytteissä: ysköksenä. keuhkoputkien pesu, keuhkopussin suonensisäinen eksudatti, virtsa, aivo-selkäydinneste, osteolyysi punctates, naisen sukupuolielinten suonituotteet ja erilaiset biopsia-näytteet. Tutkimuksessa Alankomaissa noin 500 yskös ja keuhkoputkien huuhtelu näytteet 340 Diagnosoidun keuhkotuberkuloosi tutkittiin vertaamaan herkkyys PCR-menetelmiä, mikroskopia ja kulttuurin tutkimuksen tahroja. Analyysin herkkyys oli vastaavasti 92,6,88,9 ja 52,4%. Tässä tapauksessa kaikkien menetelmien spesifisyys oli noin 99%.

    Vertailu mykobakteerin tuberkuloosin havaintotehokkuudesta smearmikroskopian menetelmällä, kylväminen Lowenstein-Jensen-väliaineella, WASTES-testijärjestelmä ja PCR-analyysi. PCR: n herkkyys oli 74,4%, mikroskopia - 33,8%, kylväminen tiheässä ympäristössä - 48,9% ja JÄTTEET - 55,8%. Levenshtein-Jensen-väliaineen kylvöiden keskimääräinen tunnistusaika on 24 vuorokautta. JÄTTEET - 13 päivää, PCR - 1 päivä.

    Lisäksi käsitellään mahdollisuuksia käyttää PCR: tä herkäksi ja nopeaksi menetelmäksi tuberkuloosin hoidon tehokkuuden seuraamiseksi.

    Havaitseminen Mycobacterium tuberculosis DNA: sta PCR tehokas kemoterapian pidemmän aikaa - keskimäärin 1,7 kuukausi verrattuna preparaatti määritelty fluoresenssimikroskoopilla, ja 2,5 kuukausi verrattuna bakteriologinen tutkimus.

    Extrapulmonaalisen tuberkuloosin diagnosointi

    PCR: n herkän menetelmän arvo on erityisen suuri extrapulmonaalisille muodoille, koska näissä muodoissa kliiniset röntgenmenetelmät ja perinteiset bakteriologiset menetelmät mykobakteerin tuberkuloosin määrittämiseksi diagnostisissa materiaaleissa ovat tehottomia.

    Tutkimuksessa virtsanäytteiden PCR-tulokset olivat positiivisia 16 17 potilailla, joilla on aktiivinen TB ja negatiivinen virtsan 4 potilasta aktiivinen munuaisten tuberkuloosi ja 39 potilasta, joilla on virtsateiden sairaus nontubercular.

    PCR-analyysin tehokkuus osoitettiin luuytimen aspyraattien tutkimuksessa potilailla, joilla oli epäselvä synnytyksen kuume epäiltynä taudin tuberkuloosista. Tuberkuloosin lymfadeniitin diagnosoimiseksi lapsilla tutkittiin läpipainoprosentti ja biopsianäytteitä, joissa oli 67 tuberkuloosin lymfadeniitin epäiltyä lasta. Positiiviset tulokset saatiin: reaaliaikaisella PCR: llä - 71,6%. fluoresenssimikroskopia - 46,3%. kulttuuritutkimukset - 41,8%. Tutkimuksessa, jossa oli 50 imusolmukebiopsiasta potilailla, joilla oli kissaa naarmuuntumistauti, kaikki tulokset olivat negatiivisia. Siten osoitettiin PCR-analyysin 100-prosenttinen spesifisyys. Samassa työssä, imusolmukkeiden punkturabiopsian kanssa, havaittiin M. aviumin havaitsemismahdollisuus.

    Naisten sukupuolielinten tuberkuloosin diagnosointi hedelmättömyyden tiedetään olevan yksi vaikeimmista diagnoosi-ongelmista. Tutkimus, jossa käytettiin endometriumin biopsiat, endometriumin aspiraatit ja nestemäiset näytteet Douglas-tilasta 14: ssa (56%) 25 potilaasta, jotka tutkittiin laparoskooppisesti epäiltynä tuberkuloosilla, osoittivat positiivisia tuloksia. Käyttämällä värjäysmikroskopiaa ja viljelmätutkimuksia saatiin vastaavasti 1 ja 2 positiivisia tuloksia. Nämä tapaukset olivat myös PCR-positiivisia. Useimmat PCR-positiiviset tulokset liittyvät tapauksiin, joissa on tyypillisiä tuberkuloosin merkkejä histologisen tutkimuksen mukaan; vähemmän, jos epäillään olevan tuberkuloosia laparoskopian mukaan. Vain yksi positiivinen PCR-analyysi saatiin tuberkuloosin laparoskooppisten tietojen puuttuessa.

    Kun diagnosoidaan tuberkuloosin eritysmuotoja, lääkäreillä on usein kysymys mahdollisuudesta havaita patogeeni verinäytteiden PCR-tutkimuksessa. Kirjallisuustiedot osoittavat, että Mycobacterium tuberculosis -bakteerin DNA-detektio verinäytteistä on mahdollinen kehittyneiden HIV-infektion muotojen kanssa. Mycobacterium tuberculosis -DNA todettiin vain, jos eri elinten tuberkuloosi yleistyi potilailla, joilla oli siirretty munuainen ja immunosuppressio.

    Mykobakteerien laji tunnistaa

    PCR-menetelmä voi olla varsin tehokas mycobacterium tuberculosis -kompleksin ja eräiden ei-tuberkuloottisten mykobakteerien nopean tunnistamisen jälkeen niiden alkuperäisen kasvun jälkeen. Tässä tapauk- sessa PCR: n käyttö voi säästää 7-10 päivää, jotka vaaditaan positiivisen tuloksen myöhemmälle kulttuuri-tunnistukselle. Tutkimus PCR: llä on teknisesti hyvin yksinkertainen, koska se ei vaadi kliinisen materiaalin monimutkaista näytteenvalmistusta korkean herkkyyden saavuttamiseksi. Tutkimuksessa 80 positiivista viljelmää tällaisessa testijärjestelmässä (MB VasT, Organon-yrityksestä) kaikki PCR-analyysin positiiviset tulokset olivat tarkasti spesifisiä ja suoritettiin 1 päivän ajan. Tunnistaa muita mykobakteerilajeja valmistettaessa DNA patogeenin kulttuurin hybridisoitiin erityisiä leimattujen DNA-koettimien kanssa akridiini ja kantojen havaita ulkonäön kemiluminesenssin välityksellä kemiluminometrissä tai nitroselluloosaliuskoille visuaalinen arviointi hybridisaation jälkeen. Tällä kitillä tunnistetaan rajoitettu määrä lajeja: Mycobacterium tuberculosis complex. M. avium, M. avium -kompleksi, M. kansasii ja M. gordonae.

    A.Telenti et ai. he kehittivät myös suhteellisen yksinkertaisen ja edullisen menetelmän kliinisesti tärkeiden mykobakteerien lajeille, jotka perustuvat PCR: ään ja sen jälkeen käsittelemällä kahdella restriktioentsyymillä (entsyymit, joilla on ominaisuuksia leikata DNA-molekyyli tietyissä kohdissa). Kun tämä monistuu, DNA-fragmentti. (65 kDa), minkä jälkeen PCR: llä saadun 439 nukleotidiparin DNA-fragmentti käsitellään erikseen kahdella entsyymillä - Bste II ja Hae III. Sitten, käyttämällä agaroosigeelielektroforeesia, analysoidaan kahden saadut tuotteet määrittäen niiden koot (nukleotidiparien lukumäärä) käyttäen joukkoa standardia DNA-fragmentteja (molekyylin DNA-markkereita), joiden pituus on 100-1 000 nukleotidiparaparia. Kussakin tietyissä lajeissa (M. tuberculosis, M. avium, M. intracellulare, M. kansasii, M. fortuitum) löytyy 2-3 eri DNA-fragmenttia jokaiselle restriktioentsyymille. Eri-kokoisten DNA-fragmenttien yhdistelmä mahdollistaa näiden lajien erilaistumisen keskenään.

    Biologisten DNA-mikrosirujen tekniikkaa kehitetään. joka auttaa tunnistamaan yli 100 erilaista mykobakteerityyppiä yhdessä tutkimuksessa.

    Laji tunnistaminen voidaan myös suorittaa käyttäen 16S rRNA-muuttujan alueen PCR-monistusta, jota seuraa amplikonien sekvensointi verrattuna vastaaviin primaarirakenteeseen, mikä mahdollistaa yli 40 mykobakteerilajien tunnistamisen.

    PCR: n avulla lajeja tunnistetaan myös mycobacterium tuberculosis -kompleksin sisällä, mukaan lukien M. bovisin ja M. bovis BCG: n erilaistuminen. Tätä varten analysoidaan tiettyjen geenien läsnäolo tai puuttuminen RD1: n genomisilla alueilla. RD9 ja RD10. RD1 puuttuu M. bovis BCG: stä, mutta se esiintyy virulentteissä lajeissa, mukaan lukien M. bovis.

    Mycobacterium tuberculosin huumeiden herkkyyden määrittäminen PCR: n avulla

    Molekyyligeneettisten menetelmien tehtävät Mycobacterium tuberculosis -bakteerin herkkyyden tai resistenssin määrittämiseksi vähennetään tunnettujen geenien tiettyjen nukleotidisekvenssien mutaatioiden tunnistamiseen. Tärkeimmät menetelmät perustuvat joko näiden sekvenssien suoraseen lukemiseen (sekvensointi) amplifikaation jälkeen tai biotinilla leimattujen DNA-fragmenttien hybridisaatiossa amplifioituna PCR: n aikana DNA-koettimien kanssa. Molemmat variantit viittaavat nukleotidisekvenssien substituutioiden tunnistamiseen, jotka käyttävät DNA-koettimia käytettäessä nitroselluloosamembraanista puuttumista tai puutteellista hybridisaatiota käyttämällä entsyymi-konjugaattia (streptavidiini-alkalinen fosfataasi) - LIPA-Rif-TB -menetelmää.

    Menetelmää fluoresenssin mittaamiseksi DNA-koettimissa, jotka on paikallisesti kiinnitetty mikrosivustoihin, jotka täydentävät tunnettuja mutaatioita geenien PCR-monistetuilla alueilla, jotka ovat vastuussa lääkeherkkyydestä tai resistenssistä, kutsutaan mikrobiochip-menetelmäksi. Perusalgoritmi tämän tutkimuksen suorittamiseksi on seuraava. Eristämisen jälkeen DNA kliinisestä näytteestä tai kulttuuri mykobakteerien on tarpeen suorittaa PCR-monistus asiaankuuluvien fragmenttien rpoB-geenin vastaavan lääkeaineen herkkyys rifampisiini tai katG ja INHAN geenejä, jotka koodaavat proteiineja, Mycobacterium ovat vastuussa herkkyyttä Isoniatsidi. PCR-tulokset arvioidaan agaroosigeelielektroforeesilla, mikä vahvistaa vastaavan halutun pituisen DNA-fragmentin valmistuksen. Tätä seuraa toinen kierros PCR: tä fluoresoivan leiman tuomiseksi DNA: han. PCR-tulokset vahvistetaan uudelleen geelielektroforeesilla. Sen jälkeen, hybridisaatio suoritettiin (inkuboitu yön yli), minkä jälkeen pestiin saatu materiaali on biosirun, joka on suuri määrä kiinteitä pieni lasilevy lyhyt DNA-säikeiden (koettimia), jotka ovat komplementaarisia nukleotidisekvenssejä lääkettä tunteva Mycobacterium tuberculosis pisteissä mahdollisista mutaatioista. samoin kuin huumeidenkestävyydestä vastaavat mutanttisekvenssit. Levyllä olevien DNA-koettimien järjestely on tiukasti määritelty ja havaitun fluoresenssin taso hybridisaation aikana tuloksen määrittämiseksi käyttäen erityistä lukulaitetta asetetaan. Tässä suhteessa analyysin tulokset määritetään käyttämällä erityistä tietokoneohjelmaa.

    Viime vuosina on kehitetty vaihtoehtoisia menetelmiä Mycobacterium tuberculosis -bakteerin herkkyyden määrittämiseksi reaaliaikaiseen PCR-tekniikkaan perustuen, mikä mahdollistaa näiden tutkimusten tekemisen suljetussa putkistotilassa.

    Kuv. Kuvio 13-13 esittää Mycobacterium tuberculosis -bakteerin kliinisten viljelmien analyysin tulosta määritettäessä lääkeaineen vastustuskyky rifampisiinille reaaliaikaisen PCR: n avulla: 218 - kontrollinäyte (herkkä rifampisiinille); 93 - positiivinen kontrolli Ser-Trp TCG-TGG-mutaatiolle; 4482 - positiivinen kontrolli Ser-Leu TCG-TTG-mutaatiolle; 162-322 - kokeelliset näytteet. Tulos laskea kineettiset vahvistuskäyrät 4 kanavaa varten: kanava 1: 393 - positiivinen kontrolli Ser-Trp TCG-TGG-mutaatiolle; kanava 2: 4482 - positiivinen kontrolli Ser-Leu-TCG-TTG-mutaatiolle; 162, 163, 172, 295 - kokeelliset näytteet; kanava 4: kaikkien kokeeseen liittyvien näytteiden kineettiset monistuskäyrät. Positiivinen kontrollin monistusreaktio. Päätelmät: analyysin tulokset paljastivat seuraavat mutaatiot, jotka määrittelivät rifampisiiniresistenssin: näytteissä 162, 163, 172, 295 - Ser-Leu TCG-TTG. Samaa periaatetta käytetään määrittämään lääkeaineen vastustus isoniazidille katG- ja inhA-geeneille, jotka määrittävät yleisimmät mutaatiot.

    Mycobacterium tuberculosis -kantaa

    Perusteellisimmin tutkittu tunnistusmenetelmä Mycobacterium tuberculosis on tekniikkaa kutsutaan restriktiofragmentin (RFLP RFLP,. Tai Englanti versio) ja joka perustuu fragmentirovanin (rajoitus) Mycobacterium tuberculosis DNA-entsyymin Pvu II ja saatujen fragmenttien myöhempi hybridisaatio tiettyjen sekvenssien DNA- sen toistuva elementti on IS6110. Intraspesifinen vaihtelevuus toteutuu IS6110: n toistokertojen ja niiden sijainnin DNA: n eri lukumäärän vuoksi. sekä entsyymi restraasin (restriktiokohtien) ja elementin IS6110 tiettyjen kohtaamisten välisten etäisyyksien erilaisuus. Tämä tekniikka on hyvin monimutkainen ja aikaa vievä. Käsittelyn jälkeen DNA uutetaan Mycobacterium tuberculosis, geelielektroforeesi suoritetaan restriktioentsyymillä, ja siirrettiin sitten DNA-fragmentit eripituiset nitroselluloosakalvolle, hybridisaatio suoritettiin fragmenttien IS6110-elementin ja detektoidaan entsymaattisia reaktioita. Tuloksena oleva erityinen kaavajoukko karakterisoi Mycobacterium tuberculosis -tietokannan DNA: n. Tietokoneanalyysin avulla paljastettiin kantojen identiteetti tai affiniteetti. Vaikka RFLP-menetelmä on kaikkein syrjivin, ts. paljastaa suurimman osan eroista analysoiduissa kannoissa, se on tehoton pienissä (alle 5) IS6110-toistumissa, joita havaittiin eräissä kannoissa. Kuv. Kuviot 13-14 esittävät kantojen RFLP-typistämisen tuloksia.

    Vaihtoehtona voi olla spoligotyping-menetelmä (spoligotyping) - DNA-sekvenssien välisen välikappaleen polymorfismin analysointi - välituote DR-alueen suorien toistojen välillä. Kantojen spoligotypingin suorittamisen yhteydessä PCR suoritetaan alukkeilla, jotka rajoittavat DR-aluetta, minkä jälkeen muodostetaan eri pituisia fragmentteja, jotka hybridisoituvat muuttuvien DNA-alueiden kanssa. Analysoidaan DR-alueen välike-sekvenssejä. tutkijoiden mukaan se on yksinkertaisempi, tuottavampi ja soveltuu kantojen ensisijaiseen seulontaan ja alustavaan epidemiologiseen analyysiin sekä suoraan kliinisen aineiston tutkimukseen.

    On selvää, että tehokkaampi ja teknologisesti saatavilla oleva menetelmä on VNTR (englanninkielisten sanojen lyhenne) tai menetelmä Mycobacterium tuberculosis -bakteerin DNA: n tarkkojen tandem-toistojen vaihtelevan määrän määrittämiseksi. Tämä menetelmä perustuu vain PCR: n käyttöön eikä se edellytä lisä manipulointia. Koska eri kantojen ja eri lokien tandem-toistojen lukumäärä on erilainen, eri kokoisia fragmentteja määritetään ja analysoidaan PCR-tuotteiden tuloksena olevasta elektroforeesista. Tutkijoiden mukaan VNTR: n avulla saavutetaan suurempi kantojen syrjintä kuin RFLP-menetelmällä.

    Viime vuosina on kiinnitetty paljon huomiota W-Beijing-perheen Mycobacterium tuberculosis -kantoihin (joskus niitä kutsutaan Pekingin kannaksi), joka on suurelta osin huumeidenkestävää.

    Molekyylilääketieteellisten tutkimusten laatuvaatimukset

    PCR: n perussäädökset

    Venäjän terveysministeriön määräykset: nro 45, päiväys 7.2.2000, nro 219, 21.3.2003. Nro 64, 21.2.2000. Menetelmäohjeet: 1.3.1888-04 "Työn organisointi PCR-tutkimuksissa patogeenisten biologisten yhdisteiden III-IV-patogeenisuusryhmien aineet "; 1.3.1794-03 "Työn organisointi I-II-patogeenisuusryhmien mikro-organismeilla infektoidun materiaalin PCR-tutkimusten aikana". 2003.; 3.5.5.1034-01 "Ihmisten I-IV patogeenisillä bakteereilla infektoituneen testin materiaalin desinfiointi käytettäessä PCR-menetelmää", 2001. Yhdenmukaisten mikrobiologisten tutkimusmenetelmien ohjeistus tuberkuloosin toteamiseksi, diagnosoimiseksi ja hoitamiseksi

    Henkilökunta

    Kliinisen laboratoriodiagnostiikan, bakteriologin, virologian, kliinisen diagnostiikkalaboratorion biologit ja erikoislääkärin erikoislääkärit, jotka ovat suorittaneet erikoistumisen ja jatkokoulutuksen määrätyllä tavalla, voivat suorittaa molekyylibiologisia tutkimuksia.

    Laitostilaboratorio

    Seuraavia laboratoriotiloja tarvitaan:

    • Näytteenjalostusalue on laboratorio, joka on sovitettu toimimaan patogeenisten ryhmien III-IV infektoivien aineiden kanssa menetelmän ohjeiden 13.1888-04 mukaisesti.
    • Vyöhyke reaktioseosten valmistamiseksi PCR - laboratoriohuone, joka suojaa sisäistä laboratorion saastumista - "puhdasta" vyöhykettä.
    • • Jos elektroforeesia tai hybridisaatiota käytetään PCR-tuotteiden analysointiin. laboratoriotila, jossa lisättyjä DNA-fragmentteja uutetaan vahvistusputkesta ja joka näin ollen voidaan vapauttaa ympäristöön PCR-laboratorioiden vaatimusten mukaisesti (ohjeet 1.3.1794-03, ohjeet 1.3.1888-04) on oltava kokonaan eristetty edellisissä kohdissa mainituista tiloista. Kaikkien henkilöiden, laitteiden, materiaalien ja esineiden "puhdasta" vyöhykettä sekä ilmanvaihtojärjestelmän tai vedosten aiheuttamia siirtoja elektroforeesivyöhykkeestä näytteen käsittelyvyöhykkeelle ja "puhdas" alueelle olisi jätettävä pois. Tätä vyöhykettä ei vaadita PCR-tuotteiden fluorimetrisen havaitsemisen kannalta.
    • Tilat dokumentaatioon ja tulosten käsittelyyn on varustettu tietokoneilla ja tarvittavilla toimistolaitteilla. Laitteet voidaan sijoittaa tähän huoneeseen PCR-tuotteiden havaitsemiseksi avaamatta putkea. - fluoresoivat PCR-ilmaisimet ja termosykoottorit reaaliaikaiselle PCR: lle.

    Sanastus- ja epidemiologiset vaatimukset ysköksen ensisijaisesta hoidosta ovat samanlaisia ​​kuin tuberkuloosin mykobakteereihin liittyvien standardien mikrobiologiset vaatimukset.

    Täydellinen sarja laboratoriolaitteita PCR-diagnostiikkaan

    Laboratorion paketti sisältää laitteita seuraavissa tiloissa.

    • Näytteenottoväline sisältää seuraavat laitteet: laminaarinen II -suojausluokka "SP-1.2": kiinteä tila -termostaatti, jossa on lämmitetty kansi Eppendorf-tyyppisille putkille; mikrocentrifuga 13 000 rpm; sentrifugointi ("Vortex"); jääkaappi, jonka lämpötila-alue on -20 ° C - +10 ° C; ProLine-sarjan tilavuuspipetit; pumppu OM-1-pulloaukolla; pipetti jalusta; kolmijalan työpiste 200x0,5 ml; jalustan työpiste 50x1,5 ml; telineet säilytysputkille 80x1,5 ml;
    • tilaa reaktioseoksen valmistamiseksi: suojaava kammio PCR-laatikko ("Laminar-C" 110 cm); sentrifugointi - "Vortex"; Professional-sarjan vaihtelevia pipettejä; pipetti jalusta; kolmijalan työpaikka 200 x 0,2 ml; telineet säilytysputkille 80x1,5 ml; jääkaappi, jonka lämpötila-alue on -20 ° C - +10 ° C;
    • elektroforeesi huone: horisontaalisen elektroforeesin kammio; virtalähde; transilluminaattori;
    • DNA-vahvistin tai nukleiinihappojen analysointi (reaaliaikainen PCR) tietokoneella ja ohjelmistolla; voidaan sijoittaa mihin tahansa vapaaseen huoneeseen. Jos käytät PCR-tekniikkaa reaaliajassa. elektroforeesilaa ei tarvita.

    Ulkoinen laadunvalvonta

    Luottamukselle objektiivisesti luotettavien tulosten saavuttamiseksi laboratorioiden olisi osallistuttava laboratoriotutkimuksen ulkoiseen laadunarviointijärjestelmään.

    Osallistujat laatujärjestelmään saavat; 12 ampullia, joissa on lyofilisoituja bakteerisolujen suspensioita, joista kaksi sisältää E. coli E. colia, 3 ampullia mykobakteerin tuberkuloosilla (avirulentti kanta) konsentraatiossa 10 2 / ml; 3 ampullia, joilla on samankaltaisen kannan solut konsentraatiolla 10 4 / ml; 2 ampullia, joissa ei tuberkuloottiset mykobakteerit M. avium-intracellulare ja M. kansasii konsentraatiossa 10 5 / ml.

    Hajautetut testit ulkoiselle laadun arvioinnille testataan kahdessa itsenäisessä laboratoriossa, joilla on laaja kokemus tällä alalla.